Засіб для лікування плоскоклітинного раку та спосіб лікування

1 Засіб для лікування плоскоклітинного раку, що містить активну сполуку, який відрізняється тим, що як активну сполуку він містить ефективну КІЛЬКІСТЬ антитіла або молекули антитіла, яке (яка) зв'язується на амінокислотній ПОСЛІДОВНОСТІ WFGNRWHEGYR 2 Засіб за п 1, який відрізняється тим, що як антитіло або молекулу антитіла він містить моноклональне антитіло BIWA-1 (VFF-18), яке одержують від лінії клітин пбридоми, що депонована під №DSM ACC2174, або похідне цього антитіла 3 Засіб за одним з пп 1 або 2, який відрізняється тим, що як антитіло або молекулу антитіла він містить моноклональне антитіло, Fab- або F(ab')2фрагмент імуноглобуліну, рекомбінантно одержане антитіло, рекомбінантно одержане химерне або гуманізоване антитіло, біфункцюнальне антитіло або одноланцюгове похідне антитіла (scFv) 4 Засіб за одним з пп 1-3, який відрізняється тим, що він містить антитіло або молекулу антитіла, яке (яка) зв'язується з радіоактивним ізотопом, сполукою, що фотоактивується, радіоактивною сполукою, ферментом, флуоресцентним барвником, молекулою біотину, токсином, цитостатиком, проліками, молекулою антитіла з іншою специфічністю, цитокіном або іншим імуномодулюючим поліпептидом 5 Спосіб лікування плоскоклітинного раку, що базується на зв'язуванні молекули антитіла на епітопі, який кодується варіабельним екзоном v6 гена CD44, який відрізняється тим, що використовують антитіло або молекулу антитіла, що впізнає амінокислотну ПОСЛІДОВНІСТЬ WFGNRWHEGYR 6 Спосіб за п 5, який відрізняється тим, що як антитіло або молекулу антитіла використовують моноклональне антитіло BIWA-1 (VFF-18), яке одержують від лінії клітин пбридоми, що депонована під №DSM ACC2174, або похідне цього антитіла 7 Спосіб за одним з пп 5 або 6, який відрізняється тим, що як антитіло або молекулу антитіла використовують моноклональне антитіло, Fab- та Р(аЬ')2-фрагмент імуноглобуліну, рекомбінантно одержане антитіло, рекомбінантно одержане химерне або гуманізоване антитіло, біфункцюнальне антитіло або одноланцюгове похідне антитіла (scFv) 8 Спосіб за одним з пп 5-7, який відрізняється тим, що використовують антитіло або молекулу антитіла, яке (яку) сполучають з радіоактивним ізотопом, сполукою, що фотоактивується, радіоактивною сполукою, ферментом, флуоресцентним барвником, молекулою біотину, токсином, цитостатиком, проліками, молекулою антитіла з іншою специфічністю, цитокіном або іншим імуномодулюючим поліпептидом о ю (О о (О 61065 Винахід стосується способу діагностики і лікування плоскоклітинного раку, що базується на експреси варіабельного екзона v6 гена CD44, засобу для здійснення такого способу, а також його застосування Недавно було показано, що експресія варіантів глікопротешу поверхні CD44 необхідна і достатня для того, щоб викликати так звану спонтанну метастатичну поведінку не тільки в неметастазуючій лінії клітин аденокарциноми підшлункової залози щура, але також у неметастазуючій лінії клітин фібросаркоми щура (Gunthert і ш , 1991) Утой час, як найменша ізоформа CD44, стандартна форма CD44 s, повсюдно експресується в ряду різних тканин, у тому числі епітеліальних клітин, певні варіанти сплайсингу CD44 (CD44v) експресуються тільки на підгрупі епітеліальних клітин Ізоформи CD44 так виробляються через альтернативний сплайсинг, що ПОСЛІДОВНОСТІ 10 екзонів (v1-v10) у CD44s цілком вирізаються, однак, при великих варіантах можуть існувати в різних комбінаціях ( Screaton І ш , 1992, Heider і ін , 1993, Hofmann і ін , 1991) Варіанти розрізняються тим, що у певне положення позаклітинної частини білка вбудовуються різні амінокислоти] ПОСЛІДОВНОСТІ Такі варіанти можна було виявити в різних пухлинних клітинах людини й у тканині пухлини людини Так, недавно була досліджена експресія варіантів CD44 у ході колоноректального канцерогенезу (Heider і ш 1993) Експресія варіантів CD44 недостатня в нормальному епітелії товстої кишки людини, і лише слабка експресія виявляється в проліферуючих клітинах крипт На ПІЗНІХ стадіях прогресування пухлини, наприклад, у випадку аденокарциноми, експресуються всі ЗЛОЯКІСНІ перероджені варіанти CD44 Далі, недавно була показана експресія сплайсингових варіантів CD44 в активованих лімфоцитах, а також у випадку неходжкінських лімфом (Koopman і ш , 1993) ВІДОМІ різні підходи, що придатні для здійснення диференціальної експресії варіантного екзона гена CD44 у пухлинах і нормальних тканинах для способів діагностики і лікування (міжнародні заявки на патенти 94/02633, 94/12631, 95/00658, 95/00851, європейський патент 0531300) Також досліджена експресія варіантних молекул CD44 при плоскоклітинному раку Saimi і ш (1993) виявили за допомогою специфічного до v6 антитіла Var3 1 ослаблення експресії v6 у пухлинних клітинах у порівнянні з нормальними клітинами Brooks і ін (1995) одержали за допомогою специфічного до v6 антитіла 119 гетерогенне забарвлення при раку носоглотки Тільки в 2 із 12 випадків було досягнуте сильне забарвлення, у той час, як у більшості випадків імунопстолопчно змогли виявити тільки слабку фокальну експресію v6 Завдання поданого винаходу полягало в розвитку нових способів діагностики і лікування плоскоклітинного раку, а також у розробці засобів для здійснення таких способів Це завдання могло бути вирішене за допомогою поданого винаходу Воно стосується способів діагностики і лікування плоскоклітинного раку, що ґрунтуються на експресії варіантного екзона v6 гена CD44 як молекулярного маркера або мішені Зокрема, поданий винахід стосується способів, що ґрунтуються на сильній і гомогенній експресії v6 при плоскоклітинному раку, яку несподівано змогли твердо встановити, всупереч теорії, ВІДОМІЙ при існуючому рівні техніки Молекули антитіл із ВІДПОВІДНОЮ специфічністю придатні, зокрема, як лікарська основа, щоб селективно добратися in vivo до плоскоклітинного раку При цьому перевага віддається способам, які відрізняються тим, що при цьому застосовується молекула антитіла, яка впізнає амінокислотну ПОСЛІДОВНІСТЬ -QWFGNRWHEGYRQT, особливо переважно амінокислотну ПОСЛІДОВНІСТЬ WFGNRWHEGYR Особливо перевага при цьому віддається моноклональному антитілу BIWA-I (клон VFF-18), що утворюється від лінії клітин пбридоми, депонованої 7 61994 під № DSM АСС2174 у Німецькій Колекції мікроорганізмів і клітинних культур (DSM) ГмбХ, Машеродер Вег 1Ь, D-38124 Брауншвейг, Німеччина (міжнародна заявка на патент 95/33771), або похідному цього антитіла Інші аспекти поданого винаходу стосуються застосування таких молекул антитіл, за допомогою яких здійснюють спосіб згідно винаходу, а також засоби для здійснення цього способу Відома нуклеотидна й амінокислотна ПОСЛІДОВНІСТЬ варіантного екзона v6 гена CD44 (Screaton і ш , 1992, Tolg і ш , 1993) Існування дегенерованих або алельних варіантів не має значення для здійснення винаходу, тому подібні варіанти безумовно включаються ПОСЛІДОВНІСТЬ екзона v6 людського гена CD44 являє собою ТІ C S С А A T С Т ї£Т 1 T А А А С GA З Д \СА GC S C C G A С C С G С С- A А C A f г С '« ? G к а « ь г г, і a Q А*« GAA С С ГСС ТГТ 5GC AAC AGA TGG CAT 5?G CfSS. 1'JC C1C CA6 А АСА CCC RSA GA? GAC ?CC