Похідні (3-алкоксіізоксазол-4-іл)заміщеної 2-амінокарбонової кислоти та їх сірковмісні аналоги, фармацевтична композиція на їх основі

1 ПОХІДНІ (3-алкоксмзоксазол-4-іл)заміщеноі 2 амінокарбонової кислоти та їх сірковмісні аналоги загальної формули І або II де Ri - це Сі б-алкіл, Сгє-алкеніл, Сгє-алкініл циклоалк(ен)іл, циклоалк(ен)іл-Сі б-алк(ен/ш)іл або феніл-Сі б-алк(ен/ш)іл, причому фенільна група необов'язково заміщена CF3, галогеном, Сі 3, алкілом або Сі є-алкокси, А - це зв'язок або спейсер, вибраний з Сі єалкілену, Сг б-алкенілену або С є-алкінілену і циклоалкілену, В - це група -CR a (NR b Rc)-COOR 5 , де Ra-Rc - це незалежно водень або Сі є-алкіл, і Rs має такі самі значення, що і Ri, або це півалоілоксиметил або водень, або В - це група формули III V КИСЛОТИ ТА IX / де R2, R3 i R4 вибирають незалежно з групи, що складається з a) водню, Сі 6-алкілу, Сг є-алкенілу, Сг є-алкінілу, циклоалк(ен)ілу, циклоалк(ен)іл-Сі б-алк(ен/ін)ілу, феніл-Сі 6-алкілу, ТІЄНІЛ-СІ є-алкілу, і b) Сі 6-алкілу, Сгє-алкенілу і Сг є-алкінілу, в яких один або декілька атомів вуглецю замінені на N, О та/або S, або R3 і R4 з'єднані з утворенням Сг є-алкілену, C-z єалкенілену або C-z є-алкінілену або R4 і R2 з'єднані з утворенням Сі з-алкіленової, C-z 3алкеніленової або C-z з-алкініленової групи, необов'язково моно- або дизаміщеної гідрокси або метилом, або з утворенням групи СН2-О-СН2, Е - це COOR6, де R6 має такі ж значення, що і Rs, або Е - це тетразол-5-іл, 1,2,4-триазол-З-іл або 1,2,3-триазол-4-іл, X - це О або S, Y - це О або S, і їх фармацевтично прийнятні солі 2 Сполука за п 1, яка відрізняється тим, що має формулу І 3 Сполука за п 1, яка відрізняється тим, що має формулу II 4 Сполука за будь-яким з пп 1 - 3, яка відрізняється тим, що Е -це група COOR6, де R6 не є воднем, переважно це Сі є-алкіл, феніл-Сі єалк(ен/ш)іл або півалоілоксиметил 5 Сполука за будь-яким з пп 1 - 3, яка відрізняється тим, що Е -це група СООН 6 Сполука за будь-яким з пп 1 - 3, яка відрізняється тим, що Е -це тетразол-5-іл, 1,2,4-триазол3-іл або 1,2,3-триазол-4-іл, 7 Сполука за будь-яким з пп 1 - 6, яка відрізняється тим, що В -це група формули -CR a (NRbR c )COOR5 8 Сполука за п 7, яка відрізняється тим, що Rb та Rc - це водень, a R a - це водень або Сі є-алкіл, переважно це водень або метил 9 Сполука за пп 7 або 8, яка відрізняється тим, О 00 о> (О ю 52698 що F 5 - це водень ? 10 Сполука за пп 7 або 8, яка відрізняється тим, що R5 не є воднем, переважно це Сі є-алкіл, феніл-Сі є-алк(ен/ін)іл або півалоілоксиметил 11 Сполука за будь-яким з пп 1 - 6, яка відрізняється тим, що В - це група формули III 12 Сполука за п 11, яка відрізняється тим, що R2, R3 та R4 - це водень або Сі є-алкіл, або R4 і R2 з'єднані з утворенням Сі з-алкіленової групи 13 Сполука за п 12, яка відрізняється тим, що кожний із F?2, R3Ta R4 - це водень 14 Сполука за будь-яким з пп 1 - 13, яка відрізняється тим, що X - це кисень 15 Сполука за будь-яким з пп 1 - 13, яка відрізняється тим, що X - це сірка 16 Сполука за будь-яким з пп 1 - 15, яка відрізняється тим, що Y - це кисень 17 Сполука за будь-яким з пп 1 - 15, яка відрізняється тим, що Y - це сірка 18 Сполука за будь-яким з пп 1 - 17, яка відрізняється тим, що Ri - це Сі 6-алкіл, Сгє-алкеніл або , переважно метил, етил, пропіл або пропарпл 19 Сполука за будь-яким з пп 1 - 18, яка відрізняється тим, що А - це зв'язок або Сі з-алкілен, переважно метилен 20 Сполука по п 2, яка відрізняється тим, що А це зв'язок або Сі з-алкілен, В - це група формули CH(NH2)-COOH або група формули III, де кожний з R3, R4 та R2 - це водень, X та Y - це кисень, та Ri це Сі 6-алкіл, Сгє-алкеніл або Сгє-алкініл, переважно метил, етил, пропіл або пропарпл 21 Фармацевтична композиція, яка відрізняється тим, що містить сполуку за будь-яким з пунктів 1 20 разом з фармацевтично прийнятним носієм або розчинником 22 Сполуки за будь-яким з пунктів 1 - 20 для виготовлення фармацевтичної композиції для лікування церебральної ішемії, хвороби Гентінгтона, епілептичних порушень, хвороби Паркінсона, хвороби Альцгеймера, шизофренії, болю, депресії або страху Цей винахід відноситься до нового класу похідних 3-алкоксиізоксазол-4-іл)заміщених 2амінокарбонових кислот та їхніх сірковмісних аналогів Ці сполуки є лігандами рецепторів для збуджувальних амшокислот(ЕАА), зокрема, лігандами рецепторів для АМРА та/або NMPA, корисними при лікуванні церебральної ішемії, хвороби Гентінгтона, епілептичних порушень, хвороби Паркінсона, хвороби Альцгеймера, шизофренії, болю, депресії та страху В результаті широких досліджень в останні три десятиріччя механізмів збудження в центральній нервовій системі(ЦНС) тепер існує єдина думка, що (З)-глутамат(СІи) є головним ЕААнейротрансмітером в ЦНС [Lodge, D , Excitatory Ammo Acids in Health and Disease J Wiley & Sons Chichester, 1988, Wheal, H , Thomson, A , Excitatory Ammo Acids and Synaptic Transmission Academic Press London, 1991, Meldrum, В S, Excitatory Ammo Acids Antagonists Blackwell Sei Publ Oxford, 1991, Krogsgaard-Larsen, P, Hansen, J J , Excitatory Ammo Acids Receptors Design of Agonist and Antagonists E Horwood Chichester, 1992] Нейротрансмісія, що управляється Glu, опосередкується великою КІЛЬКІСТЮ рецепторів, що поділяються по меншій мірі на чотири різні сімейства рецепторів, що називаються класами рецепторів для NMDA, АМРА, каїнової кислоти і метаботропними рецепторами [Monaghan, D Т, et al , Ann Rev Pharmacol Toxicol , 1989, 29, 365 - 402, Watkms, J С, Krogsgaard-Larsen, P, Honore, T, Trends Pharmacol Sci , 1990, llr 25 - 33, Simon, R P , Excitatory Ammo Acids Thieme Med Publ New York, 1992] важливим фактором при церебральній ішемії після емболії, травми голови, асфіксії, субарахноідальноі кровотечі, зупинки серця і інших ситуацій [Lodge, D, 1988, див вище, Meldrum, В S, 1991, див вище] На тваринних моделях показано, що пошкодження, які викликані різноманітними ішемічними станами, можна загальмувати шляхом введення Glu-антагоністів Таким чином, хоча відносне значення різноманітних ЕАА-рецепторів у явищах, що лежать в основі ішемічних інсультів, неясно, сходяться в думці, що антагоністи ЕААрецепторів є потенційними лікувальними засобами при таких станах Існує вагоме свідчення, що підтримує точку зору, що надмірне збудження, опосередковане ЕАА-рецепторами("ексцитотоксичність"), є дуже Результати, що накопичуються, одержувані на різних напрямах нейрохімічних і фармакологічних досліджень, наводять на думку, що зруйновані ЕАА-рецепторні механізми, певно, включаючи "ексцитотоксичність", грають деяку роль при хворобі Гентінгтона [Young, А В et al , Science, 1988, 241, 981 - 983], епілептичних порушеннях [Krogsgaard-Larsen, Р, Hansen, J J , 1992, див Вище], хвороби Паркінсона [Klockgether, Т, Turski, L, Trends Neurosci , 1989, 12, 285 - 286] і хвороби Альцгеймера [Greenamyre, J T, Maragos, W F , Cerebrovasc Brain Metab Rev, 1993, 5, 61 - 94, Francis, P T , et al , J Neurochem 1993, 60, 1589 1604] Крім того, центральні ЕАА-рецептори можуть брати участь в синаптичних механізмах, що лежать в основі шизофренії [Reynolds, G Р , Trends Pharmacol Sci , 1992, 13, 116-121], болюта страху [Drejer, J , в Excitatory Ammo Acids Receptors Design of Agonists and Antagonists (Eds Krogsgaard-Larsen, P , Hansen, J J) E Horwood Chichester 1992pp 352 - 375] і депресії [Trullas, R , Skolmck, P, Eur J Pharmacol, 1990, 185, 1 - 10, і 52698 Trullas et al , Eur J Pharmacol, 1991, 203, 379 385] Так, виявляється, що понижена функція ЕААрецепторів відіграє деяку роль, наприклад, при шизофренії [Deutsch, S І , et al , СІїп Neuropharmacol , 1989, 12, 1 - 13] і деяких КЛІНІЧНИХ симптомах, що виявляються при хворобі Альцгеймера [Greenamyre, J Т, et al, Prog NeuroPsyc ho pharmacol & Biol Psych і at, 1988, 12, 421 430] Можливо, що "ексцитотоксичність", також як і ппоактивність ЕАА, включаються в складні механізми, зв'язані з хворобою Альцгеймера [Greenamyre, J T , 1988, дивися вище, Greenamyre J T , Maragos, W F , 1993, дивися вище] ВІДПОВІДНО, вважається, що ліганди ЕААрецепторів корисні при лікуванні церебральної ішемії, хвороби Гентінгтона, епілептичних порушеннях, хвороби Паркінсона, хвороби Альцгеймера, страху, шизофренії, депресії і болю БІЛЬШІСТЬ випробуваних досі агоністів ЕААрецепторів показують більш-менш явну нейротоксичність на модельних системах, і, отже, клінічне застосування таких сполук може бути обмеженим [Carlsson, M , Carlsson, A , Trends Neurosci , 1990, 13, 272 - 276, Willetts, J , Balster, R L , Leander J D , Trends Pharmacol Sci , 1990, 11, 423 - 428] З іншого боку, для терапії можуть представляти інтерес часткові ЕАА-агоністи, що показують підхожий баланс агонізму і антагонізму, пор наведені вище показання [Greenamyre, J T, 1988, дивися вище, Chnstensen, І Т , et al , Drug Des Del , 1989, 5, 57 - 71, Francis, P T , et al , J Neurochem , 1993, 60, 1589 - 1604] Часткові агоністи можуть, в силу свого профілю антагоністів ЕАА, показувати терапевтично корисний нейрозахист і, в той же час, бути достатньо агоністичними, щоб запобігати повному блокуванню нейротрансмісм, опосередкованій рецептором для визначення ЕАА Є повідомлення, що АТРА - 5-трет-бутильний аналог АМРА ((РЗ)-2-аміно-3-(3-гідрокси-5метилізоксазол-4-іл)пропюнова кислота) системно активний, хоч немає повідомлень про нейротоксичну дію на тваринах [Ornstem, P L , et al , J Med Chem , 1993, 36, 2046 - 2048, Laundsen, J , Honore, T , Krogsgaard-Larsen P , J Med Chem r 1985, 28, 668 - 672] Виявлено, що подібно самій АМРА, ряд моно-1 біциклічних аналогів АМРА показують селективну агоністичну дію у відношенні АМРА-рецепторів [Hansen, J J , Krogsgaard-Larsen, P, Med Res Rev, 1990, 10, 55 - 94, Krogsgaard-Larsen, P, Hansen J J , 1992, дивися вище] Один з таких аналогів (RS)-2-aMmo-3-(3-riflpoKCH-5фенілізоксазол-4-іл)пропюнова кислота(АРРА), в якому метильна група АМРА замінена фенільною групою, показує слабкий, але унікальний профіль часткового агоніста [Chnstensen, І Т, et al , 1989, дивися вище] АСРА ((RS)-2-aMiHO-3-(3-Kap6oKCHOKCH-5метилізоксазол-4-іл)-пропюнова кислота) описується як потужний агоніст АМРА-рецепторів [Madsen, U , and Wong, E , J Med Chem , 1992, 35, 107-111] Крім того, в W0-A1 95012587 в якості лігандів ЕАА-рецепторів описується клас сполук (5арилізоксазол-4-іл) або (5-арилізотіазол-4іл)заміщених 2-амшокарбонових кислот Як видно з описаного вище, для лікування різноманітних згаданих вище хвороб надто бажані ненейротоксичні ліганди рецепторів для ЦНСактивних ЕАА, і, ВІДПОВІДНО, предметом цього винаходу є такі нові лікарські засоби Суть виноходу Встановлено, що новий клас похідних (3алкокси-ізоксазол-4-іл)заміщених 2амінокарбонових кислот і їхні сірковмісні аналоги є лігандами ЕАА-рецепторів, зокрема, лігандами АМРА- і/або NMDA-рецепторів ВІДПОВІДНО, цей винахід відноситься до нового класу сполук загальної формули І або II де Ri є водень, Сі б-алкіл, Сгє-алкеніл, C-z є алкініл, циклоалк(ен)іл, циклоалк(ен)іл-Сі єалк(ен/ш)іл або феніл-Сі є алк(ен/ш)іл, причому фенільна група необов'язково заміщена CF3, галогеном, Сі 6-алкілом або Сі є-алкокси, А є зв'язок або спейсер, вибраний з Сі єалкілену, Сг є~алкенілену, C-z є - алкінілену і циклоалкілену, В є група -CRa(NRbRc)-COOR5, де Ra-Rc є, незалежно, водень або Сі є алкіл, і Rs має такі саме значення, що і R1, або є півалоілоксиметил, або В є група формули III V / де R2, Ra і R4 вибирають незалежно з групи, що складається з водню, Сі є - алкілу, C-z є - алкенілу, C-z є - алкінілу, циклоалк(ен)ілу, циклоалк(ен)іл-Сі є алк(ен/ш)ілу, феніл-Сі є- алкілу, тієніл-Сі є-алкілу, і Сі є - алкілу, Сг є - алкенілу і C-z є - алкінілу, в яких один або декілька атомів вуглецю замінені на N, Ота/або S, або R3 і R4 з'єднуються, наслідком чого є С2 є - алкілен, С2 є - алкенілен або С2 є - алкінілен або R4 і R2 з'єднуються з утворенням Сі залкіленової, С2 з~алкеніленовоі або С2 3алкініленової групи, необов'язково моно- або дизаміщеної гідрокси або метилом, або з утворенням групи СН2-О-СН2, Е є COOR6, де R6 має такі ж значення, що і Rs, або Е є тетразол-5-іл, 1,2,4-триазол-З-іл або 1,2,3триазол-4-іл, X є О або S, Y є О або S, і їхніх фармацевтичне прийнятних солей В іншому аспекті винахід відноситься до способу отримання нових сполук формул І або II Ще в одному своєму аспекті винахід відноситься до фармацевтичної композиції, що містить нову сполуку формули І або II разом з підхожим фармацевтичне прийнятним носієм або розріджувачем Ще в одному своєму аспекті винахід відно 52698 ситься до застосування сполуки формули І або II для отримання фармацевтичної композиції для лікування церебральної ішемії, хвороби Гентінгтона, епілептичних порушень, хвороби Паркінсона, хвороби Альцгеймера, шизофренії, болю, депресії або страху Виявлено, що деякі сполуки даного винаходу є лігандами АМРА-рецепторів з афінністю при мікромолярних концентраціях, а деякі сполуки зв'язуються з рецепторами для NMDA Крім того, виявлено, що деякі з сполук винаходу є агоністами, в той час як ІНШІ сполуки є антагоністами Таким чином, сполуки винаходу корисні при лікуванні церебральної ішемії, хвороби Гентінгтона, епілептичних порушень, хвороби Паркінсона, хвороби Альцгеймера, шизофренії, болю, депресії і страху Сполуки, в яких R5 та/або F?6 не є воднем, є проліками ВІДПОВІДНИХ сполук, в яких Rs і F?6 є водень Докладний опис винаходу Деякі з сполук загальних формул І або II можуть існувати у вигляді їхніх оптичних ізомерів, і такі оптичні ізомери також охоплюються даним винаходом В загальних формулах І або II термін "Сі єалкіл" визначений для позначення лінійної або розгалуженої алкільної групи з 1 - 6 атомами С, в тому числі таких як метил, етил, 1-пропіл, 2-пропіл, 1-бутил, 2-бутил, 2-метил-2-пропіл тощо Подібним чином, С2б~алкеніл і С2б~алкініл позначають ВІДПОВІДНІ ЛІНІЙНІ або розгалужені групи з 2 - 6 атомами С, а Сі 6-алкілен, C-z є~алкенілен і Сг є-алкінілен позначають такі ЛІНІЙНІ або розгалужені двовалентні групи Циклоалкіл позначає відповідну групу з З - 7 атомами вуглецю, а термін "Сі є-алкокси" позначає ВІДПОВІДНІ групи, що містять Сі 6-алкільну, Сг є~алкенільну або Сг є~алкінільну групи, які зазначені вище Термін "алк(ен/ш)іл" означає, що група може представляти алкільну, алкенільну або алкінільну групу Термін "зв'язок" (при визначенні А) означає, що В може приєднуватися безпосередньо в положенні 4 ізоксазольного кільця Галоген означає фтор, хлор, бром або йод Деякі з сполук загальної формули І або II можуть існувати у вигляді фармацевтичне прийнятних солей, які також охоплюються даним винаходом Солі сполук загальної формули І або II є солями, утвореними з нетоксичними органічними кислотами, наприклад, малеїновою, фумаровою, бензойною, аскорбінової, щавлевою, винною, молочною і яблучною кислотою, або з неорганічними кислотами, наприклад, хлористоводневою, бромистоводневою, сірчаною, фосфорною і азотною кислотою, або вони можуть уявляти солі неорганічних основ, такі як солі лужних металів, наприклад, натрієві, калієві або ЛІТІЄВІ СОЛІ, СОЛІ лужноземельних металів, наприклад, кальцієві або магнієві солі, або солі амонію, або солі органічних основ В формулах І і II А є, переважно, зв'язок або Сі з-алкілен, найбільш переважно - метилен В є, переважно, група -CRa(NRbRc)-COOR 5 , де Ra-Rc є водень, і Ra є водень або Сі є-алкіл, звичайно, метил, або група формули III, де R2, R3 і 8 R4 є водень або Сі є-алкіл, або R4 і R2 з'єднуються з утворенням Сі-Сз-алкіленової групи Найбільш переважно, В є -CH(NH2) -СООН або група формули III, де кожний з F?2, R31 R4 є водень Переважно, Е є СООН, триазоліл або тетразоліл, переважно - СООН Друга підгрупа включає сполуки, в яких Е є COOR6, де R6 не є Н ВІДПОВІДНО, в преважніи підгрупі сполук винаходу X і Y є О Іншими підгрупами є підгрупи, де X є О, a Y є S, Y є О, а X є S, і X і Y є, ВІДПОВІДНО, S R1, переважно, є Сі є-алкіл, С2б~алкеніл або С2б~алкшіл Особливо преважними групами Ri є метил, етил, пропіл, бутил і пропарпл В більш прийнятному варіанті здійснення винаходу сполука є сполукою формули І де А є зв'язок або Сі-Сз-алкілен, В є -CH(NH 2 ) -СООН або група формули III, де кожний з R3, R4 і R2 є водень, X і Y - обидва - є кисень, і Ri є Сі є-алкіл, C-z б~алкеніл або Сі є-алкініл Особливо підхожими групами Ri є метил, етил, пропіл, бутил або пропарпл У ВІДПОВІДНОСТІ з винаходом, сполуки формул І або II одержують наступними способами Задля простоти, реакції а) - є) і д) - п) показані тільки для сполук формули І Ті Ж способи можуть застосовуватися у відношенні сполук формули II а) Щоб отримати сполуку формули І, де В є CRa(NRbRc)-COOR 5 , де Ra-Rc і R5 мають встановлені раніше значення, і по меншій мірі один з Rb, R51 R6 є водень, здійснюють відщеплення захисної групи від сполуки загальної формули IV COORs' RiY де R5, A, X і Y мають встановлені раніше значення, Ra'-Rc', E' і R5' мають значення, встановлені для Ra-Rc 1 Е 1 R5, ВІДПОВІДНО, або вони є захисними групами, за умови, що по меншій мірі одна з груп Е', R5' і Re' є захисною групою Ь) Щоб отримати сполуку формули І, де В є група -CRa(NRbRc)-COOR 5 , де Rb, Re 1 R5 - всі - є воднями, здійснюють відщеплення захисної групи від сполуки загальної формули V де R-і, A, Y, X і Е' мають встановлені раніше значення с) Щоб отримати сполуку формули І, де В є група формули III, здійснюють реакцію приєднання-елімшування сполуки загальної формули VI зі сполукою загальної формули VII 52698 де А, X, Y, Е' і В' мають встановлені вище значення, і після цього сполуки поділяють і відщепляють захисні групи д) Щоб отримати сполуки формули І, де Rs і/або R6 відрізняються від водню, здійснюють етерифікацію сполуки формули XIII або XIV V / Rs— 10 OHH C2 3 C де R1-R4 A, X, Y і Е' мають встановлені раніше значення d) Щоб отримати сполуку формули І, де В є група формули III, де R4 і R2 з'єднуються з утворенням Сі з-алкіленової, C-z з~алкеніловоі або C-z 3алкініленової групи, необов'язково моно- або дизаміщеної гідрокси або метилом, здійснюють реакцію сполуки формули VIII Д де Ri, R2, R3, R4, А, X, Y і Ra-Rc мають встановлені вище значення п) Щоб отримати сполуку формули І, де В є група -CRa(NRbRc)-COOR5, де Ra, Rb, Re і R5 - всі - є воднями, і Е є СООН, у вигляді певного чистого енантюмера, сполуку формули XV ,т~ R3 R— 2 r R де Ri, R3, А, X, Y і Е' мають встановлені раніше значення, R4 і R2 з'єднуються з утворенням групи, визначення якої дається вище, і ВОС є третбутоксикарбоніл, з 3,4-діетокси-3-циклобутен-1,2дюном, і після цього замикають кільце і відщеплюють захисну групу є) Щоб отримати сполуку формули І, де В є група формули III, і один або декілька R2 - R4 відрізняються від водню, здійснюють алкілування сполуки формули IX де R-і, R2, R3, R4, А, X, Y, і Е' мають встановлені раніше значення, причому по меншій мірі один з R2 - R4 є водень f) Щоб отримати сполуку формули І або II, здійснюють алкілування сполуки загальної формули X НУ де А, X, Y і Е' мають встановлені раніше значення, і В' є В, за винятком значень, даних при визначенні Rb, водні Re і Rs замінюють захисною групою, алкілувальним агентом R-i'Z, де Ri' є Ri, за винятком того, що він не може бути воднем, причому шляхом цього одержують суміш сполук XI і XII піддають реакції синтезу біслактимамшокислот по Щьолькопфу (Schollkopf) і наступному відщепленню захисної групи від отриманого біс-лактимефіру формули XVI L 1 де X, Y, Ra 1 Ri мають встановлені раніше значення, і А має значення, визначені для А, за винятком того, що А не може являти собою зв'язок В способі винаходу переважними захисними групами є наступні групи у випадку Е = СООН - 4,5-дипдро-4,4диметилоксазол-2-іл, Сі є-алкіл або бензильна група, у випадку Rs = водень - Сі є-алкіл, і у випадку Rb = водень - Сі 6-ал кіл карбон ил Стадію відщеплення захисної групи по способу здійснюють шляхом обробки сполуки формули IV підхожою водною кислотою, звичайно - 0,5 - 12 N водним розчином НСІ, водним 48% розчином НВг або насиченим розчином НВг в оцтовій кислоті Відщеплення захисної групи можна також здійснити постадійно з використанням водних кислот і водних основ, традиційно - послідовно у водній кислоті, такій як 0,5 - 12 N НСІ, водній основі такій як 1 - 8 N NaOH, і водній кислоті, такій як 0,5 -12 N НСІ, або послідовно в водній основі, такій як 1 - 8 N NaOH, у водній кислоті, такій як 0,5 -12 N НСІ ВИХІДНІ речовини формули IV зручно одержувати з 3-алкокси-4-метилізоксазол-5-карбоновоі кислоти [WO 95/12587, А1] шляхом повного відщеплення захисних груп у водній кислоті у ВІДПОВІДНОСТІ з описаними вище умовами відщеплення захисної групи, необов'язкової етерифікації 3пдрокси-4-метилізоксазол-5-карбоновоі кислоти і наступного алкілування підхожим галогенідом або просто шляхом алкілування За цим слідує бромування 4-метилізоксазольноі групи і наступне алкі 12 11 52698 лування попередником амінокислоти, наприклад, як описано в Kmney, W А , et al , ЕР-А2-0496561 діетилацетамідомалонатом Інші 4-алкілізоксазоли ВИХІДНІ речовини формули VIII можна отримаможна отримати шляхом подовження ланцюга, ти шляхом взаємодії, наприклад, 4наприклад, при алкілуванні ціанідом або діетилбромметилізоксазолу, отриманого так, як це опималонатом і наступної трансформації до первинсано у відношенні вихідних речовин при способі а, ного алкіл галогеніду або альдегіду Галогенід моз захищеним однією ВОС-групою алкилендіаміжна обробити так, як описане вище Альдегід ном, дивися ЕР-А2-0496561 можна використати в якості вихідної речовини для Алкілування сполук загальної формули IX по отримання сполук загальної формули V способу є зручно здійснювати в інертному органічному розчиннику, такому як підхожий спирт, кетон При способі b стадію відщеплення захисної або диметилформамід, переважно, в присутності групи здійснюють шляхом обробки сполуки форпідхожої основи, такої як гідрид натрію, карбонат мули V підхожою водною кислотою або водною калію або триетиламш, як описано в Kmney, W А , основою, переважно - 0,5 - 0,8 N соляною кислоЕР-А2-0496561 ВИХІДНІ речовини формули IX мотою Відщеплення захисної групи можна також жна отримати по способу с здійснити постадійно шляхом використання водних кислот і водних основ, як описано вище для При способі f відщеплення захисних груп від способу а Гідантошове кільце можна також розсполук загальних формул XI і XII здійснюють так, щепити шляхом використання водного розчину як це описано при способі а, або з використанням Ва(ОН)2, водної 10 - 70% сірчаної кислоти або при розчину хлористоводневої кислоти в діетиловому використанні ферментів, таких як пдантоінази ефірі або іншим способом відщеплення захисної Розщеплення пдантоінового кільця можна здійсгрупи в неводному середовищі Вихідну речовину нити або до, або після відщеплення захисної групи X одержують так, як це описано вище у відношенні від групи Е Групу Ri можна знову ввести шляхом вихідних речовин в способі а алкілування після повного відщеплення захисних При способі g етерифікацію можна здійснювагруп від проміжної пдантоінової сполуки ти способами, добре відомими в техніці, наприклад, шляхом обробки кислим розчином спирту Гідантошові кільця в сполуках загальної форВИХІДНІ речовини одержують по способу а - є або мули V підхожим образом утворяться по спосоh бам, описаним Ware, Е , Chem Rev , 1950, 46r 403 - 470 Розщеплення пдантошового кільця зручно Розщеплення сполук загальної формули І зруздійснювати способами, аналогічними описаним в чно здійснювати шляхом утворення діастереомерCurry, К , et al, J Med Chem , 1988, 31, 864 - 867, них солей з використанням оптично активних кисFarnngton, G К, et al , J Med Chem, 1987, 30, лот або основ, наприклад, 1-фенілетиламшу В 2062 - 2067, Grunevald, G L , et al , J Med Chem , деяких випадках розщеплення зручно здійснювати 1980, 23, 754 - 758, Hiroi, К, et al , Chem Pharm шляхом утворення діастереомерних сполук і наBull , 1968, 16, 444 - 447, або в Stark, G R , et al , J ступного розподілу діастереомерів шляхом флешBiol Chem , 1963, 238, 214 - 226 ВИХІДНІ речовини хроматографм або кристалізації Деякі діастереодля отримання сполук формули V можна отримати мери можна зручно одержувати шляхом асиметтак, як описано вище у випадку отримання вихідричного синтезу при використанні синтезу бісних речовин для способу а Якщо А є зв'язок, альлактимамшокислот по Schollkopf, пор спосіб h дегід можна отримати з бромметильної сполуки При цьому синтезі ВИХІДНІ речовини є алкілгалогешляхом бромування і наступної трансформації в нідами, отриманими так, як описано вище у випадальдегід ку вихідних речовин для способу а Захисна група для 5-карбоксиізоксазольноі групи представляє, Реакцію приєднання-елімшування по способу переважно, 2-оксазолшову групу, отриману з ВІДс зручно здійснювати в протонному органічному ПОВІДНОГО 5-ціаноізоксазолу [WO 95/12587, А1] розчиннику, такому як спирт, переважно, в присутшляхом конденсації з аміноспиртом ності підхожої неорганічної основи, такої як водний розчин NaOH, при кімнатній температурі Проміжні сполуки формули VII можна отримати способами, описаними в Cohen, S , et al , J Amer Chem Soc , 1966, 88, 1533 - 1536, EP-A2-0496561, або в Kmney, W A , et al , J Med Chem , 1992, 35, 4720 4726 Проміжні сполуки загальної формули VI легко отримати за допомогою синтезу первинних амінів по Габріелю, як описано в Sheehan, J С , et al , J Am Chem Soc , 1950, 72, 2786 - 88 ВИХІДНІ алкілгалогеніди для цього синтезу зручно одержувати так, як це описано у відношенні вихідних речовин, що використовуються при способі а, дивися вище Відщеплення захисних груп зручно здійснювати з використанням водної кислоти або водної основи, переважно - 0,5 - 8 N НСІ або водного 0,5 - 8 N розчину NaOH, або при кімнатній температурі, або при підвищених температурах При способі d реакцію і наступні замикання кільця і відщеплення захисних груп здійснюють так, Солі сполук винаходу легко одержують способами, добре відомими в техніці, тобто шляхом взаємодії сполуки або з еквівалентною КІЛЬКІСТЮ кислоти або основи в розчиннику, що змішується з водою, такому як ацетон або етанол, з виділенням солі шляхом концентрування і охолодження, або при реакції з надлишком кислоти або основи в розчиннику, який не змішується з водою, такому як етиловий ефір або хлороформ, з безпосереднім виділенням потрібної солі Ці СОЛІ можна також отримати класичним способом подвійного розкладу ВІДПОВІДНИХ солей Сполуки загальної формули І і їхні фармацевтичне прийнятні солі приєднання кислот можна вводити будь-яким підхожим способом, наприклад, перорально або парентерально, і сполуки можуть знаходитися в будь-якій ПІДХОЖІЙ ДЛЯ такого введення формі, наприклад, в формі таблеток, капсул, порошків, сиропів або розчинів або дисперсій для ІН'ЄКЦІЙ 14 13 52698 Ефеїсгивна добова доза для сполуки загальної куумі, і одержують неочищену цільову сполуформули І або и фармацевтичне прийнятної солі ку(3,0г, 24%) Загальний вихід складає 93% На складає від 10мкг/кг до 50мг на кг маси тіла наступній стадії використовують суміш цих двох Приклади зборів В подальшому винахід пояснюється за допо2) Етил-3-пдрокси-4-метилізоксазол-5могою прикладів, які не слідує розглядати як такі, карбоксилат що обмежують даний винахід 3-Гідрокси-4-метилізоксазол-5-карбонову кисВсі температури плавлення визначають на лоту(6,0г, 42ммоль) і насичений розчин НСІ в приладі SMP-20, Buchi, і вони є некоректованими ЕЮН(110мл) кип'ятять зі зворотним холодильни1 13 Спектри Н ЯМР і С ЯМР реєструють на спектком протягом 4 годин Розчин концентрують у ва1 рометрі Brucker, 250МГц(250,13МГц у випадку Н куумі і залишок розчиняють в ЕЮАс, 13 ЯМР і 62,90МГц у випадку С ЯМР) з використансушать(МдЭО4) і концентрують у вакуумі, і одерням в якості стандарту ТМС, якщо немає інших жують неочищену названу в заголовку сполувказівок ку(7,2г, 100%) Невеликий зразок перекристалізовують(ЕЮАс з гептаном) і одержують безбарвну Мас-спектри одержують на системі MS-MS кристалічну речовину, Т пл 133 - 134°С НеочиQuattro від VG Biotech, Fisons Instruments, з'єднащений продукт використовують на наступній стадії ний з модульною системою НРІ_С(рідинноі хромабез додаткової очистки тографії високого розрізнення) HP 1050 В генератор розсіяних електронів за допомогою 3) Етил-3-метокси-4-метилізоксазол-5автоматичного пробовідбирача з швидкістю потоку карбоксилат ЗОмкл/хвил вводять 20 - 50мкл зразка(10мкг/мл), Суміш етил-3-пдрокси-4-метилізоксазол-5розчиненого в суміші 1% оцтової кислоти в суміші карбоксилату(1,0г, 5,8ммоль), йодистого метиацетонітрилу з водою (1 1) або в суміші ацетонітлу(0,4мл, 5,8ммоль) і КгСОз(1,6г, 11,7ммоль) в рилу з водою і водним розчином аміаку(25%) ДМФА(40мл) гріють при 40°С протягом 1 години (25 25 1) (цвиттерюни) Спектри реєструють при Суміш виливають в суміш води з льодом(ЮОмл) і стандартних умовах для отримання інформації екстрагують діетиловим ефіром(3 х ЮОмл) Оргапро молекулярну масу (М+Н)+) або (М-Н) Фон винічні екстракти промивають водою(2 х 50мл), розчитають солом(50мл), сушать(МдЭО4) і концентрують у вакуумі(0,8г, 74%) Процедуру повторюють, щоб Аналітичну HPLC здійснюють на колонці 150 х отримати сирий продукт, еквівалентний 17,5ммоль 4,6мм, Lichrocart 250 - 4(Merck), елюють при 35°С вихідної речовини, і піддають його флешметанолом з 0,01 М розчином ацетату амонію, рН8 хроматографі і (силікагель, елюент - суміш дихлор(3 2), зі швидкістю Імл/хвил Обладнання, що виметану з діетиловим ефіром, 9 1), і одержують користовується, складається з насоса для HPLC неочищену цільову сполуку у вигляді жовтого масL6200, колончастого термостата L5025 і УФла(1,4г, 43%), що використовують на наступній детектора VIS І_4000А(встановлений на 230нм) стадії без додаткової очистки Чистоту діастереомерів, виражену у вигляді надлишку fliacrepeoMepy(de), обчислюють по площі 4) Етил-4- (бромметил)-3-метоксиізоксазол-5карбоксилат ПІКІВ Аналіз способом хіральної HPLC здійснюють Етил-3-метокси-4-метилізоксазол-5на колонці 150 х 4,6мм з Sumichiral OA-5000, елюкарбоксилат(1,3г, 7,0ммоль), NBS(Nюваної при температурі навколишнього середобромсукцинімід)(1,4г, 7,9ммоль), дибензоілпероквища 5мМ розчином СиЭО4(водн) зі швидкістю сид(каталітична КІЛЬКІСТЬ) І тетрахлорметан(40мл) Імл/хвил Обладнання, що використовується, кип'ятять зі зворотним холодильником протягом складається з автоматичного пробовідбирача AS Югодин Суміш охолоджують, фільтрують і конце2000, насоса для HPLC L6200, колончастого тернтрують у вакуумі, і одержують сиру цільову спомостата Т6300, УФ-детектора VIS луку у вигляді жовтого масла(1,8г, 97%) НеочиL4250(вcтaнoвлeний на 240нм) і приладу сполущений продукт використовують на наступній стадії чення з комп'ютером D 6000 - всі від Merck-Hitachi без додаткової очистки Чистоту енантюмерів, висловлену у вигляді над5) Етил-2-ацетамідо-2-(етоксикарбоніл)-3-[5лишку енантиомеру(ее), обчислюють по площі (етоксикарбоніл)-3-метоксиізоксазол-4-іл]пропюнат ПІКІВ Суміш діетилацетамідомалонату(1,6г, Приклад 1 7,4ммоль) і трет-бутоксиду калію(0 9г, 8/0ммоль) в \Л/-метилпіролідоні(30мл) перемішують при кімнатГідрат (РЗ)-2-аміно-3-(5-карбокси-3ній температурі протягом ЗОхвилин Додають етилметоксиізоксазол-4-іл)-пропюновоі кислоти (сполу4-(бромметил)-3-метоксиізоксазол-5ка 1) карбоксилат(1,8г, 6,8ммоль) в N1) 3-Гідрокси-4-метилізоксазол-5-карбонова метилпіролідоні(Юмл) (темп 22 - 28°С) і отриману кислота в результаті суміш перемішують при кімнатній те3-Етокси-4-метилізоксазол-5-карбонову кисломпературі протягом 1,5 годин Реакційну суміш ту(15г, 8 ммоль) і 47% НВг(водн ) (150мл) кип'ятять виливають в суміш льоду з водою(ЮОмл) і водну зі зворотним холодильником протягом 6 годин фазу екстрагують ЕЮАс (3 х 150мл) Органічні Розчин охолоджують і збирають фільтрацією крисекстракти промивають водним розчином третталічну названу в заголовку сполуку (8,7г, 69%), Т бутоксиду калію, водою (100мл) і розсолом пл 257 - 259°С До кислого фільтрату додають (ЮОмл), сушать (MgSO4) і концентрують у вакуумі воду(ЮОмл) і екстрагують діетиловим ефіром(6 х Після флеш-хроматографі І (силікагель, елюент 400мл) Органічні екстракти промивають розсолом суміш ЕЮАс з гептаном, 1 1) одержують сиру ці(100мл), висушують(МдЭО4) і концентрують у ва 15 льову сполуку(1,8г, 66%) Невеликий зразок перекристалізовують (ЕЮАс з гептаном) і одержують безбарвну кристалічну речовину, Т пл 78 - 80°С Сирий продукт використовують на наступній стадії без додаткової очистки 6) Гідрат (РЗ)-2-аміно-3-(5-карбокси-3метоксиізоксазол-4-іл)пропюновоі кислоти (сполука 1) Суспензію етил-2-ацетамідо-2(етоксикарбоніл)-3-[5-(етоксикарбоніл)-3метоксиізоксазол-4-іл]пропюнату(1,2г, З.Оммоль) в 0,5 М НСІ(ЮОмл) кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 48 годин Суміш охолоджують, промивають дихлорметаном(ЮОмл) і діетиловим ефіром(2 х ЮОмл), фільтрують і концентрують у вакуумі Додають воду(5мл) і доводять рН приблизно до 3, додаючи розчин NaOH(0,1 М М М ) Водну фазу зменшують в об'ємі у вакуумі(2мл) і збирають осадок фільтрацією Осадок перемішують у воді(2мл) при кімнатній температурі протягом 24 годин і після фільтрації одержують сполуку 1(70мг, 10%), Т пл 222 - 225°С (розкл ) 1 Н ЯМР (ДМСОde) 5 2,88(дд, 1Н), 3,01 (дд, 1Н), 3,85 - 3,96(м, 1Н), 3,90(с, ЗН) 1 3 С Я М Р Щ М С О ^ б ) d 22,70, 52,38, 57,32, + 103,25, 159,43, 165,95, 170,66(2 С) М-с ( М + Н ) + т / е 231 Елементний аналіз (C8HioN 2 0 6 0,25Н 2 О) обчислено С-40,94, Н-4,51, N-11,94, знайдено С-41,01, Н-4,37, N-11,91 Подібним чином одержують перелічені нижче сполуки (РЗ)-2-аміно-3-(5-карбокси-3-етоксиізоксазол4-іл)-пропюнова кислота (сполука 2) Т пл 238 - 240°С(розкл ) 1 Н Я М Р ( Д М С О ^ 6 ) d 1,34(т, ЗН) , 2,90(дд, 1Н), 3,03(дд, 1Н), 3,96(дд, 1Н), 4,23(к, 2Н) 1 3 С Я М Р Щ М С О ^ б ) 5 14,46, 22,41, 51,89, 65,63, 103,34, 159,22, 164,97, 169,75, 170,40 М -с (М+Н) + т / е 245 Елементний аналіз (C9H12N2O6) обчислено С-44,27, Н-4,95, N-11,47, знайдено С-44,10, Н-4,92, N-11,34 (РЗ)-2-аміно-3-(5-карбокси-3ізопропоксиізоксазол-4-іл)-пропюнова кислота (сполука 3) Т пл 242 - 243°С(розкл ) 1 Н Я М Р ( Д М С О ^ 6 ) d 1,32(дд, 6Н), 2,88(дд, 1Н), 3,01 (дд, 1Н), 3,96(дд, 1Н), 4,79(г, 1Н) С Я М Р ( Д М С О ^ 6 ) 5 21,57, 21,77, 22,35, 51,82, 73,13, 103,56, 159,22, 164,91, 169,08, 170,36 М-с ((М+Н) + ) т / е 259 Елементний аналіз (C10H14N2O6) обчислено С-46,51, Н-5,46, N-10,85, знайдено С-46,37, Н-5,46, N-10,83 Гідрат (RS) -2-амшо-3-(5-карбокси-3пдроксиізоксазол-4-іл) пропюнової кислоти (сполука 4) Т пл 175 - 177°С 1 Н ЯМР (flMCO-d 6 ) 5 3,00(д, 2Н), 3,88(т, 1Н), 1 3 С Я М Р ( Д М С О ^ 6 ) 5 23,07, 52,07, 105,84, 159,41, 162,11, 169,89, 170,78 М-с ((М+Н) + ) т / е 217 Елементний аналіз (C 7 H 8 N 2 O 6 0,25Н 2 О), обчислено С-38,10, Н-3,88, N-12,70, знайдено С-37,72, Н-3,98, N-12,52 Приклад 2 Гідрат (RS) -2-амшо-3-(5-карбокси-2,3-дипдро2-метил-3-оксоізоксазол-4-іл)пропюновоі кислоти (сполука 5) Етил-2,3-дипдро-2,4-диметил-3-оксоізоксазол5-карбоксилат Суміш етил-3-пдрокси-4-метилізоксазол-5карбоксилату(2,0г, 11,7ммоль) і К2СОз(4,0г, 29ммоль) в етанолі(50мл) нагрівають при 40°С 52698 16 протягом 26 годин Через 1 годину додають йодистий метил(0,8мл, ІЗммоль) і здійснюють додавання ще 3 рази протягом наступних 25 годин Розчин фільтрують і зменшують його об'єм у вакуумі(зпдно 1 Н ЯМР, одержують суміш цільової сполуки і етил-3-метокси-4-метилізоксазол-5карбоксилату, 1 1) Флеш-хроматографія (силікагель, елюент - суміш дихлорметану з діетиловим ефіром, 9 1, потім 1 1) дасть етил-З-метокси-4метилізоксазол-5-карбоксилат у вигляді жовтого масла(0,40г, 18%) і цільову сполуку(0,45г, 21%) Невеликий зразок останньої речовини перекристалізовують(ЕЮАс/гептан) і одержують безбарвну кристалічну речовину з Т пл 64 - 65°С Сиру цільову сполуку використовують на наступній стадії без додаткової очистки Пдрат^З)-2-аміно-3-(5-карбокси-2,3-дипдро2-метил-3-оксоізоксазол-4-іл)пропюновоі кислоти (сполука 5) Названу в заголовку сполуку одержують способом аналогічним способу прикладу 1, стадії 2 6, з використанням продукту, отриманого вище на стадії 1(70мг, безбарвні кристали, 72%) Т пл 211 - 212°С(розкл) 1 Н Я М Р Щ М С О ^ б ) 5 2,87(дд, 1Н), 13 2,97(дд, 1Н), 3,43(с, ЗН), 3,92(дд, 1Н) С ЯМР(ДМСО^б) 623,10, 32,32, 51,79, 106,51, 158,59, 162,37, 166,64, 170,35 М -с ((М+Н) + ) т / е 231 Елементний аналіз (C 8 Hi 0 N 2 O 6 0,25Н 2 О) обчислено С-40,94, Н-4,51, N-11,94, знайдено С40,93, Н-4,55, N-11,71 Подібним чином одержують сполуку Моногідрат (RS)-2-aMiHO-3-(5-Kap6oKCH-2-eTnn2,3-дипдро-3-оксоізоксазол-4-іл)пропюновоі кислоти (сполука 6) 1 Н flMP(D2O, 1,4-дюксан, d 3,70) 6 1,28(т, ЗН), 3,19(д, 2Н), 4,01 (к, 2Н), 4,18(т, 1Н) 1 3 С flMP(D2O, 1,4-дюксан, 5 67,40) 5 12,87, 23,85, 42,31, 53,27, 110,57 159,88, 162,65, 166,67, 172,55 М-с (М+Н) + ) т / е 245 Елементний аналіз (C 9 Hi 2 N 2 O 6 Н 2 О) обчислено С-41,22, Н-5,38, N-10,68, знайдено С-41,28, Н-4,74, N-10,27 Приклад З (3)-2-амшо-3-(5-карбокси-3-етоксиізоксазол-4іл)пропюнова кислота (сполука (S)-2) (R)-2-aMiHO-3-(5-Kap6oKCH-3-eTOKCHi3OKca3on-4іл)пропюнова кислота (сполука (R)-2) 1) 5-(4,5-дипдро-4,4-диметил-1,3-оксазол~2іл)-3-етокси-4-метилізоксазол З-етокси-4метилізоксазол-5-карбонітрил(2,6г, 7,1ммоль), 5,4 М NaOMe в МеОН(0,6мл, 3,4ммоль) і ЕЮН(80мл) перемішують при кімнатній температурі протягом ЗО хвилин Додають оцтову кислоту(2,2мл, 39,3ммоль) і 2-амшо-2-метилпропан-1-ол(1,8мл, 18,8ммоль) і отриману суміш кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 20 годин Реакційну суміш охолоджують, додають воду(ЮОмл) і екстрагують ЕЮАс(3 х ЮОмл) Органічні екстракти промивають 1 М розчином NaOH(50Mn), розсолом, сушать(МдЗО4) і випарюють у вакуумі Залишок розчиняють в ЕЮН(бОмл), додають розчин КОН(1,8г, 32ммоль) у воді(12мл) і суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 20 годин ЕЮН видаляють у вакуумі, додають воду(80мл) і водну фазу екстрагують ЕЮАс(3 х ЮОмл) Органічні екстракти промивають розсолом, сушать(МдЗО4) і випарюють у вакуумі Флеш 18 17 52698 хроматографія(силікагель, елюент - ЕЮАс з гепдиметоксипіразину(0,6г, 1,5ммоль) в 1 М трифтотаном і триетиламіном, 75 251) дасть неочищену роцтовій кислоті(200мл) кип'ятять зі зворотним цільову сполуку у вигляді жовтого масла(2,0г, холодильником протягом 5 годин Реакційну суміш 52%) концентрують у вакуумі(2мл), залишок розчиняють у воді(50мл) і промивають ЕЮАс(3 х 50мл) Водну 2) 4-(Бромметил)-5-(4,5-дипдро-4,4-диметилфазу фільтрують, випарюють у вакуумі до сухості і 1,3-оксазол-2-іл)-3-етоксиізоксазол залишок обробляють водою(1 Омл) Осадок, що 5-(4, 5-Дипдро-4,4-диметил-1,3-оксазол-2-іл)утвориться, перемішують при кімнатній темпера3-етокси-4-метилізоксазол(2,0г, 8,9ммоль), турі протягом 24 годин, збирають шляхом фільтNBS(1,75r, 9,8ммоль) і тетрахлорметан(150мл) рації і перекристалізовують(вода), і одержують (S)кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 5 2-сполуку у вигляді безбарвних кристалів(0,12г, годин Суміш охолоджують, фільтрують і концент33%), Т пл 259 - 261°С(розкл), ее > 99%(час рують у вакуумі Флеш-хроматографія(силікагель, 1 утримання прибл ЗОхвилин) Н ЯМР(ДМСО-сІб) 5 елюент - толуол з ЕЮАс і триетиламіном, 1,34(т, ЗН), 2,90(дд, 1Н), 3,03(дд, 1Н), 3,96(дд, 1Н), 100 10 1) дасть цільову сполуку у вигляді жовтого + 4,23(к, 2Н) М -с ((М+Н) ) т/е 245 Елементний масла(2,0г, 74%) аналіз (C9H12N2O6) обчислено С-44,27, Н-4,95, N3) (23,5Р)-2,5-дигідро-2-[5-(4,5-дигідро-4,411,47, знайдено С-44,45, Н-4,96, N-11,46 диметил-1,3-оксазол-2-іл) -З-етоксиізоксазол-4 іл]метил) -5-ізопропіл-3,6-диметоксипіразин та(2Р,2Р)-2,5-дигідро-2-{[5-(4,5-дигідро-4,4диметил-1,3-оксазол-2-іл)-3-етоксиізоксазол-4-іл] метил}5-ізопропіл-3,6-диметоксипіразин До заздалегідь охолодженого (-78 °С) розчину(2Р)-(-)-2,5-дипдро-2-ізопропіл-3,6диметоксипіразину(0,5мл, 2,8ммоль) в безводному тетрапдрофурані(8мл) додають 1,6 М розчин бутиллітию в гексані(1,9мл, З.Оммоль) Продовжують перемішування при -78°С протягом 10 хвилин, додають 4-(бромметил)-5-(4,5-дипдро-4,4диметил-1,3-оксазол-2-іл) -3-етоксиізоксазол(0,85г, 2,8ммоль), розчинений в тетрапдрофурані(5мл), і отриману в результаті суміш перемішують при 78°С протягом 4,5 годин Реакційну суміш нагрівають до кімнатної температури і концентрують у вакуумі Залишок розчиняють в діетиловому ефірі(40мл) і виливають в суміш льоду з водою(40мл) Шари поділяють і водну фазу екстрагують діетиловим ефіром(2 х 40мл) Органічні екстракти промивають розсолом, сушать (MgSC^) і концентрують у вакуумі Флеш-хроматографія(силікагель, елюент - гептан з ЕЮ А, 3 1) дасть названу в заголовку(23, 5R)-cnonyKy у вигляді жовтого масла(0,65г, 57%), de = 99,2%(час утримання прибл 38 хвилин) Додаткове елюювання дасть неочищену цільову (2R, 5R)-cnonyKy у вигляді жовтого масла(38мг, 3%) 4) (2R,5S)-2,5-flHriflpo-2-{[5-4,5-flHriflpo-4,4диметил-1,3-оксазол-2-іл) -З-етоксиізоксазол-4іл]метил} -5-ізопропіл-З, 6-диметоксипіразин та (23,53)-2,5-дипдро-2-{[5-(4,5-дипдро-4,4-диметил1,3-оксазол-2-іл)-3-етоксиізоксазол-4-іл]метил) -5ізопропіл-3, 6-диметоксипіразин ЦІЛЬОВІ сполуки одержують за допомогою процедури, описаної вище на стадії 3 з використанням в якості вихідної речовини (23)-(+)-2,5-дигідро-2ізопропіл-3,6-диметоксипіразину Флешхроматографія(силікагель, елюент - гептан з ЕЮАс, 3 1) дасть названу в 3aronoBKy(2R, 5S)сполуку у вигляді жовтого масла(0,8г, 54%), de > 99,2%(час утримання прибл 38 хвилин) Додаткове елюювання дасть неочищену цільову (2S, 5S)сполуку у вигляді жовтого масла(60мг, 4%) 5) (3)-2-амшо-3-(5-карбокси-3-етоксиізоксазол4-іл)-пропюнова кислота (сполука (S)-2) Суспензію (2S,5R]-2,5-flnriflpo-2-{[5-(4,5дипдро-4,4-диметил-1,3-оксазол-2-іл)-3етоксиізоксазол-4-іл]метил}-5-ізопропіл-3,6 6) (R)-2-aMiHO-3-(5-Kap6oKCH-3-eTOKCHi3OKca3on4-іл)-пропюнова кислота (сполука (R) -2) До розчину (2К,53)-2,5-дипдро-2-{[5-(4,5дипдро-4,4-диметил-1,3-оксазол-2-іл)-3етоксиізоксазол-4-іл]мєтил}-5-ізопропіл-3,6диметоксипіразину(0,6г, 1,5ммоль) в МеОН(7мл) при перемішуванні додають 0,25 М НСІ(74мл, 7,4ммоль) і отриману в результаті суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 2 годин Доводять рН приблизно до 7, додаючи водний розчин аміаку(0,5 М), і видаляють МеОН у вакуумі Доводять рН до 8 - 9, додаючи водний розчин аміаку(0,5 М), і водну фазу екстрагують ЕЮАс(4 х 50мл) Органічні екстракти промивають розсолом, сушать (MgSO-i) і концентрують у вакуумі Залишок суспендують в 1 М НСІ і суміш кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 4,5 годин Реакційну суміш концентрують у вакуумі(2мл), залишок розчиняють у воді(50мл) і промивають ЕЮАс(3 х 50мл) Водну фазу фільтрують, випарюють у вакуумі до сухості і залишок обробляють водою(Юмл) Утворений осадок перемішують при кімнатній температурі протягом 2 годин, збирають шляхом фільтрації і перекристалізовують(вода), і одержують сполуку (R)-2 у вигляді безбарвних кристалів(0,13г, 36%), Т Пл 258 260°С(розкл), ее > 99%(час утримання прибл 1 50хвил) Н ЯМР(ДМСО^ 6 ) 5 1,34(т, ЗН) , 2,90(дд, 1Н), 3,03(дд, 1Н), 3,9 (дд, 1Н), 4,23(к, 2Н) М-с ((М+Н)+) т/е 245 Елементний аналіз (C9H12N2O6) обчислено С-44,27, Н-4,95, N-11,47, знайдено С44,56, Н-4,95, N-11,53 Приклад 4 Гідрат (RS)-2-aMiHO-3-[3-eTOKCH-5-(IH-1,2,4триазол-3-іл)-ізоксазол-4-іл]пропюновоі кислоти (сполука 7) N[(Диметиламше)метиліден]-3-етокси-4метилізоксазол-5-карбоксамід Розчин З-етокси-4метилізоксазол-5-карбоксаміду(3,5г, 21ммоль) в N,N-димeтилфopмaмlддимeтилaцeтaлl(15мл) перемішують при 120°С протягом 15 хвилин Після охолодження збирають цільову сполуку у вигляді безбарвної кристалічної речовини(4,2г, 91%) 3-(3Етокси-4-метилізоксазол-5-іл)-1 Н-1,2, 4-триазол До розчину пдразинпдрату(0,6мл, 12,4ммоль) в оцтовій кислоті(15мл) додають N[(диметиламше)метиліден]-3-етокси-4метилізоксазол-5-карбоксамід(1,8г, 8,0ммоль) Реакційну суміш перемішують при 90°С протягом 52698 20 19 15 хвилин і після цього залишають при кімнатній і шляхом фільтрації одержують сполуку 7 (0,35г, температурі для кристалізації, і одержують чисту 56%) Т пл 225 - 227°С(розкл ) 1Н ЯМР(ДМСО-с^) цільову сполуку(1,2г, 77%), Т пл 194 - 196°С До5 1,38(т, ЗН), 2,94(дд, 1Н), 318(дд, 1Н), 3,58(дд, дають воду(40мл) і водну фазу екстрагують 1Н), 4,30(к, 2Н), 8,64(с, 1Н) 13С ЯМР(ДМСО-сШ) 5 ЕЮА(3 х ЗОмл) Органічні екстракти промивають 14,52, 23,60, 53,30, 65,93, 104,25, 146,18, 150,87, розсолом, cyLuaTb(MgSO4) і концентрують у вакуу158,44, 169,47, 170,51 М-с ((М+Н)+) т/е 268 мі, і одержують неочищену цільову сполуку(0,3г, Елементний аналіз (C10H13N5O4, 0.25H2O) обчис20%) Обидві партії речовини об'єднують лено С-44,20, Н-5,01, N-25,77, знайдено С-44,42, Н-5,29, N-25,52 3-(3-етокси-4-метиізоксазол-5-іл)-1 -тритил-1 Н1,2,4-триазол Приклад 5 До 3-(3-етокси-4-метилізоксазол-5-іл)-1 Н-1,2,4(RS)-2-aMiHO-3-[3-eTOKCH-5-(5триазолу(1,1г, 5,7ммоль), триетиламшу(2,5мл, тетразоліл)ізоксазол-4-іл]-пропюнова кислота 18ммоль) і ДМФА(20мл) додають тритилхло(сполука 8) рид(1,6г, 5,7ммоль) в ДМФА(5мл) Суміш переміЦільову сполуку одержують з етил-2шують при кімнатній температурі протягом 5 годин ацетамідо-3-[3-етокси-5-(тетразол-5-іл)ізоксазол-4і виливають в суміш льоду з водою(200мл) Водну іл]-2-(етоксикарбоніл)пропюнату по способу, анафазу екстрагують діетиловим ефіром(3 х 200мл) і логічному способу, описаному в прикладі 4 органічні екстракти промивають водним розчином Приклад 6 Na2CO3(10%) (200мл) і розсолом(200мл) Розчин (RS)-2-aMiHO-3-(3-6eH3nnoKCH-5cyujaTb(Na2SO4) і концентрують у вакуумі, і одеркарбоксиізоксазол-4-іл)-пропюнова кислота (спожують сиру цільову сполуку(2,5г) Невеликий зралука 9) зок кристалізують(ЕЮАс) і одержують окремий (РЗ)-2-аміно-3-(5-карбокси-3ізомер у вигляді безбарвної кристалічної речовипдроксиізоксазол-4-іл)пропюнову кислоту(3,5г, ни, Т пл 181 - 183°С Сиру речовину використо11,8ммоль) і розчин НСІ в етанолі(50мл) кип'ятять вують на наступній стадії без додаткової очистки зі зворотним холодильником протягом 2,5 годин і випарюють у вакуумі до сухості Одержують етил3-[(4-бромметил)-3-етоксиізоксазол-5-іл]-1(RS)-2-aMiHO-3-(5-eTOKCHKap6oHin-3тритил-1 Н-1,2,4-триазол пдроксиізоксазол-4-іл)пропюнат(4,15г, 100%) Суміш 3-(3-етокси-4-метилізоксазол-5-іл)-1тритил-1Н-І,2,4-триазолу(2,4г, 5,5ммоль) і До розчину eTnn-(RS)-2-aMiHO-3-(5NBS(1,1r, 6,2ммоль) в тетрахлорметані(150мл) етоксикарбоніл-З-пдроксиізоксазол-4кип'ятять зі зворотним холодильником протягом З іл)пропюнату(4,15г, 11,7ммоль) в суміші води і 1,4годин Реакційну суміш охолоджують, фільтрують і дюксану(1 1) (50мл) додають суміш дитретбутилконцентрують у вакуумі, і одержують неочищену дикарбонату (3,1г, 14ммоль), триетиламшу(3,8г, сполуку(2,8г) Сирий продукт використовують на 37ммоль) і 1,4-диоксану(15мл) і отриману в ренаступній стадії без додаткової очистки зультаті суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 16 годин Випарюють 1,4-дюксан у Етил-2-ацетамідо-3-[3-етокси-5-(1 -тритил-1 Нвакуумі і водну фазу підкислюють розбавленою 1,2,4-триазол-3-іл)ізоксазол-4-іл]-2соляною кислотою Водну фазу екстрагують ети(етоксикарбоніл)пропюнат лацетатом і органічні екстракти промивають воСуміш діетилацетамідомалонату(1,3г, дою, розсолом, cyLuaTb(MgSO4) і концентрують у б.Оммоль) і трет-бутоксиду калію(0,73г, 6,5ммоль) вакуумі Флеш-хроматографія (SiC>2, елюентв І\І-метилпіролідоні(30мл) перемішують при кімнагептан з етилацетатом і оцтовою кислотою (1 1, тній температурі протягом ЗО хвилин Додають 34%) дає eTHn-(RS}-2-rpeT-6yroKCHKap6oHinaMiHO-3[4-бромметил)-3-етоксиізоксазол-5-іл]-1-тритил(5-етоксикарбоніл-3-пдроксиізоксазол-41Н-1.2, 4-триазол(2,8г, 5,4ммоль) в Wіл)пропюнат у вигляді масла (4,1 г, 92%) метилпіролідоні(20мл)(темп 22 - 28°С) і отриману в результаті суміш перемішують при кімнатній теСуміш eTHn-(RS)-2-rper-6yroKCHKap6oHinaMiHOмпературі протягом 2 годин Реакційну суміш ви3-(5-етоксикарбоніл-3-пдроксиізоксазол-4ливають в суміш льоду з водою(250мл) і водну іл)пропюнату (3,2 г, 8,6 ммоль) і К2С03 (2,4 г, 17,2 фазу екстрагують ЕЮАс (3 х 250мл) Органічні ммоль) в ацетоні (40 мл) нагрівають до утворення екстракти промивають водним розчином третбутофлегми Додають бензилбромід (2,2 г, 12,9 ммоль) ксиду калію і розсолом, cyujaTb(Na2SO4) і конценті суміш кип'ятять зі зворотним холодильником прорують у вакуумі Флеш-хроматографія(силікагель, тягом 1,5 годин Реакційну суміш концентрують у елюент ЕЮАс з гептаном і триетиламіном, 50 50 2) вакуумі і піддають залишок флешдасть сполуку (2,2г, 62%), Т пл 145-149°С хроматографм(ЗіО2, елюент - гептан з етилацетатом, 2 1), і одержують eTnn-(RS)-2-[(TpeTГідрат (RS)-2-aMiHO-3-[2-eTOKCH-5-(1 Н-1,2, 4бутоксикарбоніл)амшо]-3-[3-бензилокси-5триазол-3-іл)-ізоксазол-4-іл] пропюнової кисло(етоксикарбоніл)ізоксазол-4-іл]пропюнат(1,64г, ти(сполука 7) 41%) і етил -(RS)-2-[(TpeT-6yroKCHKap6oHin)aMiHo]Суспензію етил-2-ацетамідо-3-[3-етокси-5-(13-(2-бензил-5-етоксикарбоніл-2,3-дипдро-3тритил-1 Н-1,2,4-триазол-3-іл)ізоксазол-4-іл]-2оксоізоксазол-4-іл)пропюнат(0,7г, 18%) (етоксикарбоніл)пропюнату(1,5г, 2,3ммоль) в 1 М НСІ(150мл) кип'ятять зі зворотним холодильником Суміш eTnn-(RS)-2-[(TpeTпротягом 24 годин Розчин охолоджують, промибутоксикарбоніл)амшо]-3-[3-бензилокси-5вають діетиловим ефіром (2 х 150мл) і дихлорме(етоксикарбоніл)ізоксазол-4-іл]пропюнату(0,65мг, таном(150мл), фільтрують і концентрують у вакуу1,4ммоль) і 1 М розчину NaOH(50Mn) кип'ятять зі мі Додають воду(5мл) і доводять рН приблизно до зворотним холодильником протягом 16 годин Су3,5 шляхом додавання розчину NaOH(0,1 М і 1 М), міш охолоджують(5°С), підкислюють розбавленою 21 соляною кислотою і концентрують у вакуумі Залишок перекристалізовують з води і одержують (РЗ)-2-амшо-3-(3-бензилокси-5-карбоксиізоксазол4-іл)пропюнову кислоту(0,1г, 23%) Т пл 209 211°С(розкл) 1 Н Я М Р ( Д М С О ^ 6 ) 5 2,95(дд, 1Н), 3,05(дд, 1Н), 3,99(т, 1Н), 5,26(с, 2Н), 7,31 - 7,52(м, 5Н) М -с ((М+Н) + ) т / е 307 Елементний аналіз обчислено С-54,89, Н-4,62, N-9,15, знайдено С54,31, Н-4,56, N-8,97 Подібним чином одержують перелічені нижче сполуки (RS)-2-aMiHO-3-(3-nponoKCH-5карбоксиізоксазол-4-іл)-пропюнова кислота (сполука 10) Т пл 250 - 251°С(розкл) 1 Н ЯМР(0 2 О, діоксан, 1 М NaOD) d 0,95(т, ЗН), 1,76(сп, 2Н), 2,78(дд, 1Н), 2,90 (дд, 1Н), 3,42(дд, 1Н), 4,17(т, 2Н) 1 Х ЯМР d 12,3, 24,4, 29,8, 58,3, 74,9, 111,5, 164,3, 166,6, 113г 9, 184,8 М-с ((М+Н) + ) т / е 259 Елементний аналіз обчислено С-46,51, Н-5,46, N10,85, знайдено С-46,43, Н-5,41, N-10,54 (RS) -2-амшо-3-(3-бутокси-5карбоксиізоксазол-4-іл)-пропюнова кислота (сполука 11) Т пл 238 - 240°С(розкл) 1 Н ЯМР(0 2 О, діоксан, 1М NaOD) d 0,95(т, ЗН), 1,43(сп, 2Н), 1,76(кв, 2Н), 2 8(дд, 1Н), 2,91 (дд, 1Н), 3,44(дд, 1Н), 4,25(т, 2Н) 1 3 С ЯМР(0 2 О, діоксан, 1М NaOD) d 13,79, 19,30, 27,90, 31,03, 56,39, 71,27, 109,65, 162,39, 164,72, 172,02, 182,92 М-с ((М+Н) + ) т / е 273 Елементний аналіз обчислено С-48,53, Н-5,92, N10,29, знайдено С-48,80, Н-5,99, N-10,34 (РЗ)-2-аміно-3-(3-алілокси-5карбоксиізоксазол-4-іл)-пропюнова кислота (сполука 12) Т пл 239 - 240°С(розкл ) 1 Н Я М Р ( Д М С О ^ 6 ) d 2,93(дд, 1Н) , 3,06(дд, 1Н), 3,99(дд, 1Н), 4,73(д, 2Н), 5,29 (дд, 1Н), 5,44(дд, 1Н), 6,05(дк, 1Н) Також подібним чином можна отримати (RS)-2-aMiHO-3-[3(транс-2-бутенокси)-5карбоксиізоксазол-4-іл]пропюнову кислоту та (RS) -2-амшо-З- [3- (З-метил-2-бутенокси) -5карбоксиізоксазол-4-іл]пропюнову кислоту Приклад 7 Моногідрат пдрохлориду (RS)-2-aMmo-3-(2бензил-5-карбокси-2,3-дипдро-3-оксоізоксазол-4іл)пропюновоі кислоти (сполука 13) Суміш eTnn-(RS)-2-[(TpeTбутоксикарбоніл)амшо]-3-(2-бензил-5етоксикарбоніл-2,3-дипдро-3-оксоізоксазол-4іл)пропюнату(0,9г, 1,9ммоль) і 1М НСІ кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 5 годин Суміш випарюють у вакуумі до сухості(0,56г, 80%) Т пл 146 - 148°С (розкл) 1 Н Я М Р ( Д М С О ^ 6 ) 5 3,08(дд, 1Н), 3,19(дд, 1Н), 4,17(ушс, 1Н), 5,16(с, 2Н), 7,24 - 7,45(м, 5Н) М -с ((М+Н) + ) т / е 307 Елементний аналіз обчислено С-46,60, Н-4,76, N7,77, знайдено С-46,88, Н-4,81, N-7,96 Приклад 8 Гідрохлорид 6eH3nn-(RS)-2-aMiHO-3-(5бензилоксикарбоніл-З-етоксиізоксазол-4іл)пропюнату(сполука 14) Суміш ди-трет-бутилдикарбонату(1,1г, 4,9ммоль), NaHCO 3 (1,1r, ІЗммоль) і 1,4дюксану(Змл) додають до розчину (RS)-2-aMmo-3(5-карбокси-3-етоксиізоксазол-4-іл)пропюновоі 52698 22 кислоти(1,0г, 4,1 ммоль) в суміші води з 1,4дюксаном(1 1, Юмл) і отриману в результаті суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 16 годин Випарюють 1,4-дюксан у вакуумі і підкислюють водну фазу розбавленою соляною кислотою Водну фазу екстрагують етилацетатом і органічні екстракти промивають водою і розсолом, сушать (MgSO4), концентрують у вакуумі і піддають флеш-хроматографм(ЗіО2, елюент - етилацетат з етанолом і оцтовою кислотою(3 1, 4%) Одержують (RS)-2-[(TpeT-6yroKCHKap6oHin)aMiHo]-3-(5карбокси-3-етоксиізоксазол-4-іл)пропюнову кислоту(1,4г, 100%) До суміші (RS)-2-[(TpeTбутоксикарбоніл)амшо]-3-(5-карбокси-3етоксиізоксазол-4-іл)пропюновоі кислоти(1,4г, 4,1 ммоль) і бензилброміду(1,4г, 8,2ммоль) в суміші бензолу з тетрапдрофураном(4 1) додають 1,8діазабіцикло[5 4 0]ундец-7-ен(1,3г, 8,6ммоль) і отриману в результаті суміш кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 3 годин Суміш фільтрують і випарюють у вакуумі Флешхроматографія(ЗЮ2, елюент - етилацетат з гептаном (1 3) дає 6eH3nn-(RS)-2-[(TpeTбутоксикарбоніл)амшо]-3-(5-бензилоксикарбоніл-3етоксиізоксазол-4-іл)пропюнат у вигляді масла(1,9г, 86%) Суміш 6eH3nn-(RS)-2-[(TpeTбутоксикарбоніл)амшо]-3-(5-бензилоксикарбоніл-3етоксиізоксазол-4-іл)пропюнату(1,9г, З.бммоль) і насиченого розчину НСІ в діетиловому ефірі(40мл) кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 2 годин Отримані кристали збирають фільтрацією, перемішують з етилацетатом і збирають фільтра1 цією(0,53г, 32%) Т пл 142 - 144°С Н Я М Р Щ М С О ^ є ) 5 1,32(т, ЗН) , 3,17(дд, 1Н), 3,25(дд, 1Н), 4,17 - 4,32(м, ЗН), 5,09(дд, 2Н), 5,39(с, 2Н), 7,24 -7,53(м, ЮН) М -с ((М+Н) + ) т / е 425 Елементний аналіз обчислено С-59,93, Н-5,48, N-6,08, знайдено С-59,70, Н-5,49, N-6,26 Приклад 9 Оксалат eTHn-(RS)-2-aMmo-3-(3-eTOKCH-5етоксикарбонілізоксазол-4-іл)пропюнату (сполука 15) Суміш (RS)-2-aMiHO-3-(5-Kap6oKCH-3етоксиізоксазол-4-іл)-пропюновоі кислоти(2,0г, 8,2ммоль) і розчину НСІ в етанолі(35мл) кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 3 годин і одержують eTHn-(RS)-2-aMiHO-3-(5-Kap6oKCH-3етоксиізоксазол-4-іл)пропюнат ETHn-(RS)-2-aMmo3-(5-карбокси-3-етоксиізоксазол-4іл)пропюнат(О.бг) додають до розбавленого розчину NaOH і водну фазу екстрагують етилацетатом Органічні екстракти промивають розсолом, сушать(МдЗО4) , фільтрують і випарюють до сухості у вакуумі Залишок розчиняють в ацетоні(бмл) і додають розчин щавлевої кислоти(0,14г, 1,6ммоль) в ацетоні(бмл), і осадок, що утворився, збирають фільтрацією(110мг, 10%) Т пл 159 161 °С 1 Н Я М Р Щ М С О ^ є ) 5 1,11(т, ЗН) , 1,32(т, ЗН) , 1,36(т, ЗН) , 3,02(дд, 1Н), 3,11(дд, 1Н), 3,98 4,16(м, ЗН), 4,32(к, 2Н), 4,37(к, 2Н) М -с ((М+Н) + ) т / е 301 Елементний аналіз обчислено С-46,15, Н-5,69, N-7,18, знайдено С-46,38, Н-5,69, N-7,36 Приклад 10 Оксалат 6yrHn-(RS) -2-амшо-3-(5 23 бутоксикарбоніл-3-етоксиізоксазол-4-іл)пропюнату (сполука 16) Сполуки одержують способом, подібним до способу, описаному в прикладі 9, з використанням розчину НСІ в бутанолі Т пл 120 - 121 °С 1Н ЯМР(ДМСО^ 6 ) 5 0,84(т, ЗН) , 0,92(т, ЗН) , 1,14 1,31(м, 2Н), 1,31 - 1,51(м, 4Н), 1,37(т, ЗН)/ 1,62 1,75(м, 2Н), 3,01(дд, 1Н), 3,13(дд, 1Н), 3,98 4,09(м, ЗН) , 4,16 - 4,36(м, 4Н) М -с ((М+Н)+) т/е 357 Елементний аналіз обчислено С-51,11, Н6,79, N-6,28, знайдено С-51,06, Н-6,82, N-6,35 Приклад 11 [4-(2-аміно-3,4-дюксоциклобут-1 -ен-1 іл)амшометил]-3-етоксиізоксазол-5-карбонова кислота (сполука 17) Етил-3 -етокси-4-метилізоксазол5карбоксилат Ацетилхлорид(25мл, 0,35ммоль) при 0°С додають до ЕЮН(250мл) і розчин перемішують при 0°С протягом 20 хвилин Додають розчин 3-етокси4-метилізоксазол-5-карбоновоі кислоти [W095/12587, А1](18г, О.Юмоль) в ЕЮН(20мл) і отриману в результаті суміш кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 4 годин Суміш охолоджують, додають розчин NaHCOs(200Mn) і екстрагують діетиловим ефіром (3 х ЗООмл) Органічні екстракти cyLuaTb(MgSO4) і концентрують у вакуумі, і одержують названу в заголовку неочищену сполуку(18г, 86%) Етил-4-бромметил-3-етоксиізоксазол-5карбоксилат Етил-3-етокси-4-метилізоксазол-5карбоксилат(18г, 91ммоль), NBS(17,5r, ЮОммоль), дибензоілпероксид(1г, 4,1ммоль) в тетрахлорметані(500мл) кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 16 годин Суміш охолоджують, фільтрують і концентрують у вакуумі, і одержують названу в заголовку неочищену сполуку(24,5г, 97%) Етил-3-етокси-4-фталімідометилізоксазол-5карбоксилат Розчин етил-4-бромметил-3-етоксиізоксазол-5карбоксилату(5г, 17,9ммоль) в ДМФА(85мл) додають при 90°С до суспензії фталіміду калію(3,6г, 19,7ммоль) в ДМФА(125мл) Отриману в результаті суміш перемішують при 90°С протягом 40 хвилин, після цього охолоджують і концентрують у вакуумі Додають воду(250мл) і водну фазу екстрагують діетиловим ефіром(2 х 200мл) Органічні екстракти cyLuaTb(MgSO4) і концентрують у вакуумі, і одержують сирий продукт реакції, який перекристалізовують(ЕЮН), і одержують цільову сполуку(3,70г, 60%), Т пл 93 - 94°С Гідрохлорид 4-амшометил-З-етоксиізоксазол5-карбоновоі кислоти Розчин етил-З-етокси-4фталімідометилізоксазол-5-карбоксилату в 1 М розчині NaOH кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 45 хвилин Суміш охолоджують, додають концентровану НСІ і екстрагують діетило 52698 24 вим ефіром(3 х 400мл) Органічні екстракти концентрують у вакуумі, додають 1 М НСІ(бООмл) і кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 1 години Після охолодження суміш промивають діетиловим ефіром(3 х 600мл) і концентрують у вакуумі, і одержують сирий продукт реакції, який перекристалізовують(оцтова кислота), і одержують вказану в заголовку сполуку(1,5г, 82%), Т пл 215216°С(розкл) [4-(2-амшо-3, 4-дюксоциклобут-1 -ен-1 -іл) амінометил]-3-етоксиізоксазол-5-карбонова кислота До розчину пдрохлориду 4-амшометил-Зетоксиізоксазол-5-карбоновоі кислоти(1,2г, 5,4ммоль) і 3-амшо-4-етокси-циклобут-3-ен-1,2дюну(0,60г, 5,9ммоль) в ЕЮН(ЗООмл) додають 1 М розчин NaOH(12Mn) Отриману в результаті суспензію перемішують при кімнатній температурі протягом 16 годин, після цього концентрують у вакуумі, додають воду(ЮОмл) і промивають ЕЮАс(2 х ЮОмл) Доводять рН приблизно до З, додаючи 1 М НСІ Осадок відфільтровують і перекристалізовують(вода), і отримують цільову сполуку у вигляді жовтого порошку(0,71г, 47%) Т пл 236 - 238°С(розкл) 1Н ЯМРЩМСО^ 6 ) d 1,30(т, ЗН) , 4,22(к, 2Н), 4,68(ушс, 2Н) ЇЗ С ЯМР(ДМСО^ 6 ) 5 14,41, 35,27, 65,54, 107,16, 159,14, 163,54, 168,71, 169,15, 169,73, 183,20, 183,34 М -с ((М+Н)+) т/е 282 Елементний аналіз ( С Ц Н Ц ^ О Є , 2,25 Н2О) обчислено С-41,06, Н-4,86, N-13,06, знайдено С-41,16, Н-4,46, N-12,96 Фармакологія Сполуки винаходу випробовують переліченими нижче цілком визнаними засобами, що заслуговують довіри Зв'язування [3Н]АМРА При цьому випробуванні шляхом виміру здібності до витиснення [3Н]АМРА з АМРА-рецепторів визначають афінність лікарського засобу до АМРА-рецепторів Випробування проводять по модифікованому варіанту метода Нопоге, Т , and Nielsen, M , Neurosci Lett, 1985, 54, 27 - 32 Випробування проводять в присутності KSCN Це означає, що помічаються тільки місця зв'язування з високою спорідненістю до [3Н]АМРА Мембранні препарати, що використовуються, одержують по методу Ransom, R W , and Stec , J Neurochem , 1988, 51, 830 - 836 Модель кортикального клину Модель кортикального клину уявляє випробування, при якому зрізи головного мозку пацюка досліджують in vitro, щоб КІЛЬКІСНО визначити дію лігандів на різноманітні Glu-рецептори і оцінити фармакологічний профіль лігандів(тобто, співвідношення агоністичних і антагоністичних властивостей) Випробування проводять так, як описано в Harrison, N L , and Simmonds, М А , Br J Pharmacol , 1985, 84, 381 - 391, в зміненому варіанті по Wheatley, Р L , Br J Pharmacol , 1986, 87, 159Р 25 52698 26 Таблиця 1 Кортикальний кпин Сполука 1 2 (S)-2 (R)-2 3 8 10 11 12 13 17 Профіль Агоніст Агоніст Агоніст Антагоніст Агоніст ЕС5о (мкМ) 1,2 4,8 4,4 рКі 3,28 40,0 2000 80 325 40 АГОНІСТ АГОНІСТ Част, агоніст Агоніст Антагоніст Антагоніст 3,5 3,3 Результати Виявлено, що дані сполуки є лігандами рецепторів для збуджувальних амшокислот(ЕАА) Виявлено, що деякі з цих сполук є агоністами рецепторів для АМРА, а ІНШІ сполуки є селективними антагоністами АМРА-або NMDA-рецепторів Сполуки показують активність в мікромолярному інтервалі Приклади композицій Фармацевтичні композиції даного винаходу можна отримати традиційними в техніці способами Наприклад, таблетки можна отримати шляхом змішування активного інгредієнта зі звичайними ад'ювантами та/або розріджувачами і наступного пресування суміші в звичайній таблетувальній Підтип рецептора АМРА АМРА АМРА АМРА АМРА АМРА АМРА АМРА АМРА NMDA NMDA машині Прикладами ад'ювантів або розріджувачів є кукурудзяний крохмаль, лактоза, тальк, стеарат магнію, желатин, лактоза, смоли і подібні речовини Можна використати будь-який другий ад'ювант або додаток -барвники, ароматизатори, консерванти й тощо, за умови, що вони сумісні з активними інгредієнтами Розчини для ІН'ЄКЦІЙ можна отримати шляхом розчинення активного інгредієнта і прийнятних додатків в частині носію, переважно - стерильній воді, доведення розчину до потрібного об'єму, стерилізації розчину і наповнення підхожих ампул або флаконів Можна додати будь-який підхожий додаток, який звичайно застосовується в техніці, такий як агенти ТОНІЧНОСТІ, консерванти, антиоксиданти й тощо ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)236-47-24