Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

Способ получения макролидных соединений общей формулы

где  - метил, этил, изопропил;

 - низший алкил и группа  находится в  -конфигурации;

 - гидроксильная группа,

отличающийся тем, что соединение общей формулы

где  и  имеют указанные значения, подвергают восстановлению с использованием восстанавливающего агента, способного к стереоселективному восстановлению 5-кетогруппы, такого, как боргидрид щелочного металла или литийалкоксиалюминийгидрид, причем в случае, когда в качестве восстанавливающего агента используют боргидрид щелочного металла, процесс проводят в среде растворителя, такого, как алканол, при температуре от -30 до +80°C, а в случае, когда используют литийалкоксиалюминийгидрид, то проводят в среде такого растворителя, как простой эфир, при температуре от -78 до 0°C.

Текст

Изобретение относится к способу получения новых макролидных соединений - антибиотиков, общей формулы I где - метил, этил или изопропил; - низший алкил; представляет собой гидроксильную группу; и группа находится в Eконфигурации. Известно получение производных макролидных соединений, используемых в качестве антибиотиков, например антибиотик 541 (фактор A) который может быть выделен из продуктов ферментации новых Streptomyces Sp. или получен химическим путем. Однако этот антибиотик обладает недостаточно высокой антигельминтной и инсектицидной активностью [1]. Цель изобретения получение новых макролидных соединений, обладающих более высокой антигельминтной и инсектицидной активностью. Эта цель достигается способом получения соединений формулы I, заключающимся в восстановлении соединения формулы II где и имеют указанные значения. Реакция восстановления может быть осуществлена с помощью восстанавливающего агента, который способен к стереоселективному восстановлению 5-кетогруппы. К восстанавливающим агентам относятся такие боргидриды, как боргидриды щелочных металлов (например, боргидрид натрия) и литийалкооксиалюминийгидриды, такие, как литийтрибутоксиалюминийгидрид. Реакция, использующая боргидридный восстанавливающий, протекает в присутствии такого растворителя, как алканол, например изопропиловый или изобутиловый спирт, обычно при температуре в диапазоне от -30 до +80°C, например при 0°C. Реакция, включающая использование литийалкоксиалюминийгидрида, протекает в присутствии такого растворителя, как, например, тетрагидрофуран или диоксан, и может быть проведена при температурах в диапазоне от -78 до 0°C. Изобретение иллюстрируется следующими примерами (температуры указаны в °C, а означает этанол). В приводимых примерах соединения названы производными известных факторов, факторов A, B, C и D. Фактор A представляет собой соединение, характеризуемое формулой (VI), в которой - изопропил, а водород; фактор B представляет собой соединение, характеризуемое формулой (VI), в которой - метил и - метил; фактор D представляет собой соединение, характеризуемое формулой (VI), в которой этил, а - водород; и фактор D представляет собой соединение, характеризуемое формулой (VI), в которой - этил, а - водород. Пример 1. 23(E)-Метоксиимино ФакторA (a) 5,23-дикето фактор A. Охлажденный льдом раствор, полученный из концентрированной серной кислоты (1,2мл) и дихромата натрия (120мг) в воде (2мл), добавляли в течение 15мин к охлажденному льдом раствору 5-кето фактор A (200мг) и сульфату кислого тетрабутиламмония (15мг) в этилацетате (4мл) при интенсивном перемешивании. Спустя час смесь разбавляли этилацетатом, органическую фазу промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Высушенную органическую фазу выпаривали. Полученную смолу очищали путем хроматографирования на "Мер Кизельгель 60" 230 - 400меш в количестве 100мл. В результате элюирования с помощью 10% - ного раствора этилацетата в дихлорметане было получено соединение, указанное в заголовке, в виде палево-желтой пены в количестве 86мг; включает 6,57 (мультиплет, 1H), 2,50 (синглет, 2H) и 1,89 (мультиплет, 3H). (b) 5-кето, 23(E)-метоксиимино Фактор A В соответствии с этим примером 5,23-дикето фактор A (475мг), гидрохлорид метоксиламина (69мг) и безводный ацетат натрия (175мг) растворяли в метаноле. После 1,5-часового нахождения при комнатной температуре раствор выдерживали в течение 16ч при -18°C, разбавляли этилацетатом и тщательно промывали однонормальной хлористоводородной кислотой, водой и рассолом, Высушенную органическую фазу подвергали выпариванию. Образовавшуюся пену желтого цвета подвергали хроматографированию использованием "Мер Кизельгель 60" 230 - 400меш (120мл). В результате элюирования колонки смесью, состоящей из гексана и этилацетата в соотношении 4 : 1, получено соединение, указанное в заголовке, в виде желтой пены в количестве 255мг включает 6,58 (синглет, 1H), 3,84 (синглет, 4H), 3,80 (синглет, 1H), 3,58 (мультиплет, 1Н), 3,30 (дублет 14, 1H), 0,92 (дублет 6, 3H). (c) 23(E)-метоксиимино Фактор A (I) Боргидрид натрия (6,5мг) добавляли к охлажденному льдом раствору 5-кето, 23(E)метоксиимино фактора A (83мг) в изопропаноле (20мг). Полученную смесь желтого цвета подвергали перемешиванию в течение 35мин в ледяной ванне, затем разбавляли этилацетатом и тща тельно промывали однонормальной хлористоводородной кислотой, водой и рассолом. Высушенную органическую фазу далее выпаривали. Полученную смолу желтого цвета подвергали очистке путем хроматографирования через "Мер Кизельгель 60" 230 - 400меш (60мл). Элюирование содержимого колонки осуществляли смесью, состоящей из гексана и этилацетата в соотношении 2 : 1, что позволило получить соединение, указанное в заголовке, в виде желтой пены в количестве 58мг. В результате кристаллизации из гексана получено соединение, указанное в заголовке, имеющее точку плавления 203°C, 244нм включает 4,29 (триплет 7, 1H), 3,84 (синглет, 3H), 3,29 (дублет 15, 1H). (II) Раствор 5-кето, 23(E)-метоксиимино Фактора A (50мг) в безводном тетрагидрофуране (1мл) добавляли к охлажденному до -78°C раствору гидрида литий-трис-трет-бутоксиалюминия в количестве 261мг в безводном тетрагидрофуране в количестве 3мл. После 0,75ч выдержки при -78°C полученный раствор разбавляли этилацетатом в количестве 30мл и тщательно промывали 0,5н. хлористоводородной кислотой и водой. Высушенную органическую фаз у подвергали выпариванию, а полупродукт-сырец - очистке путем хроматографирования на "Мерк Кизельгель 60" 230 - 400меш, 40мл. Элюирование осуществляли 25% ным этилацетатом в гексане с получением соединения, указанного в заголовке, в виде пены белого цвета включал 4,29 (триплет 7, 1H), 3,84 (синглет, 3H), 3,29 (дублет 15, 1H). Пример 2. 23(E)-метоксиимино Фактор A, 4ацетат. (I) Добавляли трехмолярный раствор иодида метилмагния в простом эфире (0,16мл) к перемешанному раствору продукта, полученного в примере №3 (120мг), в безводном гексаметилфосфорном триамиде (5мл) в атмосфере азота. Далее добавляли подметан в количестве (0,09мл). Спустя час смесь разбавляли этилацетатом (30мл) и тщательно промывали 2н. хлористоводородной кислотой и водой. Высушенную органическую фазу выпаривали. Образовавшуюся смолу подвергали очистке хроматографированием на "Мерк Кизельгель 60" 230 - 400меш (80мл). В результате элюирования содержимого колонки получено соединение, указанное в заготовке. Для элюирования использовали смесь, состоящую из гексана и этилацетата в соотношении 2 : 1, продукт представлял собой белую пену; 245нм 5,5 - 5,6 (м, 2H), 3,84 (с, 3H), 3,29 (д. 15, H), 2,16 (с., 3H). (II) 23(E)-оксиимино Фактор A, 5-ацетат (0,082г) растворяли в простом диэтиловом эфире (10мл), содержащем окись серебра (04г) в свежеприготовленном растворе (водном) нитрата серебра и в 2М растворе гидроокиси натрия. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2ч, после чего фильтровали. Растворитель выпаривали. В результате получали полупродукт-сырец в форме смолы желтого цвета. Остаток подвергали очистке путем препаративной тонкослойной хроматографии на "Мерк 5717" при элюировании смесью, состоящей из дихлорметана и ацетона в соотношении 25 : 1. Основн ую полосу экстрагировали ацетоном и упаривали. В результате получили соединение, указанное в заголовке (0,059г). Спектр ядерно-магнитного резонанса соответствует указанному выше. Пример 3. 23(E)-метоксиимино Фактор A, 5метилкарбамат. Метилизоцианат (0,13мл), 125мг триэтиламина (2 капли) добавляли к раствору 23(E)метоксиимино Фактор A (350мл) в безводном диметилформамиде (0,75мл). Колбу с полученной смесью плотно закрыли и нагревали в течение 5,5ч при 80°C, перемешивая. Полученную смесь вылили в воду (50мл) и фильтровали через кизельгур. Осадок на фильтре промывали водой (150мл) и экстрагировали дихлорметаном (75мл). Полученный экстракт сушили с помощью сульфата магния и концентрировали. В результате получена пена желтого цвета, которую подвергли очистке на хроматографической колонке, заполненной силикагелем, при среднем давлении (125г, "Мерк Кизелыель 60", 230 - 400меш). В результате элюирования смесью, состоящей из гексана и этилацетата в соотношении 1 : 1, получено соединение, указанное в заголовке, в виде пены белого цвета в количестве 206мг +99° 244,4нм 1720 (сложный -1 эфир), 1720 + 1510 (карбамат) и 993см включает 1,78 (синглет, 3H), 2,86 (дублет, 5Гц, 3H), 3,29 (дублет 14Гц, 1H), 3,83 (синглет, 3H), 4,80 (квинтет, 5Гц, 1H) и 5,50 (мультиплет, 2H). Пример 4. 23(E)-метоксиимино Фактор A, 5метилкарбонат. К раствору 23(E)-метоксиимино Фактор A (150мг) в дихлорметане (15мл) и пиридине (0,3мл), перемешивая, при 0°C добавляли метилхлормат (0,7мл 1,0М раствора в дихлорметане). Полученную реакционную смесь перемешивали при 0 - 3°C в течение 20мин, а затем добавляли к дихлорметану (70мл) и промывали 2н. хлористоводородной кислотой (50мл) и водой (50мл). Органическую фазу сушили сульфатом магния, растворитель удаляли. Образовавшуюся пену подвергали очистке путем хроматографирования при среднем давлении на колонке, заполненной двуокисью кремния (40г, "Мерк Кизельгель 60", 230 - 400меш). В результате элюирования смеси, состоящей из дихлорметана и этилацетата в соотношении 30 : 1, получено соединение, указанное в заголовке, в виде белой пены в количестве 127мг 244,4нм 1342 -1 (карбонат) 1710 (сложный эфир) и 992 (см ) включает 1,82 (синглет, 3H), 329 (дублет 14Гц, 1H), 3,82 (синглет, 3H), 3,83 (синглет, 3H), 5,2 - 5,4 (мультиплет 3H), 5,56 (синглет, 1H). Полученные соединения характеризуются антибиотической, например противогельминтной (противоглистной), активностью в отношении нематод, антиэндопаразитической и антиэктопаразитической активностью. Экто- и эндопаразиты поражают людей и различных животных, в особенности сельскохозяйственных (свиньи, овцы, крупный рогатый скот, козы), а также домашнюю птицу (например, кур и индеек), лошадей, кроликов, домашних животных (собаки, кошки), морских свинок, хомяков и т.д. Паразитическая инфекция в животных организмах приводит к анемии и потере веса, что является важной причиной экономических потерь во всем мире. Примерами эндопаразитов, поражающих животных и/или людей, являются Ancylostoma, Ascaridia, Ascaris, Aspicularis, Brugia, Bunostomum, Capillaria, Chabertia, Cooperia, Cyathostomes, Dictyocaules, Diropilaria, Dracunculus, Enterobius, Gastrohilus, Haemonchus, Heterakis, Hyostrongylus, Loa, Metastrongylus, Necator, Nematodirus, Nematospiroides, Nippostrongylus, Oesophagostomum, Onchocerca, Oestertayia, Oxywris, Poerahilaria, Parascaris, Probstmayria, Stromgylus, Strongyloides, Syphacia, Thelazia, Toxascaris, Toxocara, Trichonema, Trichostrongylus, Trichinella, Trichuris, Triodontophorus, Uncinaria, Wuchereria. Примерами эктопаразитов, поражающих животных и/или людей, являются артроподные эктопаразиты, (жалящие, кусающие насекомые, мясные мухи, блохи , вши, кровососущие насекомые, клещи и другие двукрылые насекомые: Ambylomma, Anopheles, Boophilus, Chorioptes, Culexpipiens, Culliphore, Demodex, Demallnia, Dermatobia, Halmatobia, Haematopinus, Haemophysalis, Hyaloma, Hypoderma, Ixodes, Unognathus, Lusilia, Melophugus, Oestrus, Otobius, Otodectes, Psoreryates, Psoroptes, Rhipicephalus, Sarcoptes, Solenopotes, Stromaxys и Tabanus). Найдено, что соединения по изобретению являются эффективными как in vitro, так и in vi vo против широкого спектра эндо- и эктопаразитов. Антибиотическая активность соединений может быть продемонстрирована на свободноживущих нематодах, таких, как Caenorhabditis elegans и Nematospiroldes dubius. Соединение, характеризуемое формулой (I), в котором - изопропильная группа, метильная группа и - гидроксильная группа, активно действует против широкого диапазона эндо- и эктопаразитов, например, является активным в живом организме против паразитических нематод (Ascari, Cooperia curticei, Cooperia oncophora, Cyathostomes, Dictyoceculus vi viparus, Dirofilaria immitis, Gastrophilus, Halmonchus contonus, Nemutodirus battus, Nematodirus helvetianus, Nematodirus spathiger, Nematospiroides dubius, Nematostrongysus brazilientis, Oesophaosiomum, Onehoeera gutturosa, Ostertagia circumcineta, Ostertagia ostettagi, Oxyuris egui, Parascaris eguorum, Probstmayria, Strongylus edentalus, Strongylus vulgaris, Toxocara canis, Trichostrogylesaxei, Trochostrongyles vitrinus, Triodontophorus и Uncinaria stenocephaia), a также против паразитических личинок, гусениц, чесоточных клещей, блох, вшей (Amblyomma hebraeum, Anopheles stevensi, Boophilus dicolarartus, Boophilus microplus, Chorioptes ovis, Cuiexpipcens molestus, Damalinia bovis, Dermatobia, Halmatopinus, Hypoderma, Linognathus vituli, Lucilia sericata, Psoroptes ovis, Rhipicephutus appendiculatus и Sarcopies). Соединения по изобретению могут быть также использованы в качестве инсектицидов, акарицидов и нематоцидов для уничтожения насекомых в сельском, лесном хозяйстве, на плантациях фр уктовых деревьев, а также в общественных местах и на складах. Уничтожаются насекомые, живущие в почве или на сельскохозяйственных культурах, включая злаки (например, пшеницу, ячмень, маис и рис), хлопчатник, табак, овощи, такие, как соя, фрукты, такие, как яблоки и цитрусовые, а также на клубневых растениях, таких, как сахарная свекла и картофель. Характерными примерами таких насекомых являются различные виды фруктовых клещей и тлей (Aphis fabae, Aulacorthum circumfiexum, Myzus persicae, Nephotettix cincticeps, Nilparoutu lugens, Panonychus ulini, Phorolon Rumuli, Phyllocoptruta oleivora, Tetranychus urtieae), а также насекомые вида Trialewroides; нематоды, например представители вида Aphelencoldes, Globodera, Heterodera, Meloidogyne и Panagrellus lepidoptera, такие, как Hellothis, Plutella и Spodoptera, а также долгоносики (Anthonomus grandis и Sitophilus granarius); мучные жуки (Тribollum castaneum), мухи (Musca domestica), муравьи, термиты (Pear psylia, Thrips tabaci), тараканы (Blatella getmanica и Peripfaneta americana), а также москиты (Aedes degypti). Соединение по изобретению, характеризуемое формулой (I), в котором - изопропильная группа, - метильная группа и гидроксильная группа, является активным по отношению к Tetranychus urticae, находящимся на листке французских бобов, против Myzus persicae на листьях китайской капусты, против Heliothis virescens на листьях хлопчатника, против Nilaparvatu lugens на ростках риса, против Musca domestica в пластиковых коробочках, в которые помещен раствор сахара и хлопчатобумажная пряжа, против Blutella Gocmanica в пластиковых коробочках с кусочками пищи, против Spodoptera exiqua на листьях хлопчатника и против Meloidogyne incognita. Данные соединения могут быть использованы в качестве фунгицидов, например, против штаммов вида Candida sp. (Candida albicans и Candida glabrata), против дрожжевые грибков (Saccharomyces carisbergensis). Соединения, характеризуемые формулой (I), могут быть использованы в качестве антибиотиков, в особенности для лечения или обработки животных и людей, зараженных эндо-, эктопаразитами и/или плесневыми инфекциями, в сельском и лесном хозяйстве - для обработки плантаций в качестве пестицидов для уничтожения насекомых, а также в качестве акарицидов и нематоцидов. В качестве пестицидов эти соединения могут быть использованы для уничтожения насекомых, например, в хранилищах, зданиях и других общественных местах, в местах обитания насекомых. Соединения могут быть применены непосредственно в организмах, где обитают эти паразиты (в организмах животного, человека, растения или овощей), по месту обитания или непосредственно на самих насекомых. Соединения по изобретению могут быть использованы в ветеринарии или медицине в виде композиций, приготовленных с помощью одного или нескольких пригодных носителей или разбавителей для парентерального ввода, включая ввод в молочную железу, а также для орального, ректального, топического, внутрижелудочного (внутрь рубца), имплантированного, офтальмического применения, через нос или генитоуринального введения. Биологическая активность. Определялась эффективность действия соединений по изобретению против инфекционного заражения мышей Nematospiroides dulius. В организм самок мышей CR/H (весом 18 - 22г) вводили 100 личинок L3 Nematospirodes dublus и обеспечивали возможность развития инфекции (обычно три недели). Затем в организм мышей однократно оральным путем вводили соединение по изобретению (в пропиленгликоле). Мышей оставляли не менее чем на три дня (обычно на пять дней), после чего животных с полностью развившейся инфекцией умерщвляли и удаляли из них тонкую кишку. Вырезанную часть кишки рассекали ножницами с затупленными краями для экспонирования слизистой оболочки кишечника. Созревших гельминтов собирали посредством модифицированного устройства Берманна. Время миграции составляло 5ч. В процессе миграции гельминты находились при температуре 37°C. По прошествии пяти часов исследовали найлоновую сетку, через которую мигрировали гельминты, с использованием увеличительного стекла 2X. Гельминтов захватывали нейлоновой сеткой, рассчитывали число мигрирующи х гельминтов, получали общее число гельминтов, приходящихся на каждую мышь, и сравнивали их с контрольными мышами. При такой обработке соединением, полученным по изобретению (2мг/кг), значительно снижалось поражение гельминтами обработанных мышей. Так, например, каждое из соединений примеров 3 и 4 дает процент снижения среднего поражения гельминтами обработанных мышей по сравнению с контрольными мышами более чем на 85%. 23E-Метоксиамино Фактор A. Оценка Фактора A. Оценка фактора A для борьбы с Trichostrongylus colubriformis у песчанок. В данных исследованиях пятинедельных самцов песчанок заражали инфицирующими личинками T.colubriformis (400 - 600) от овцы 0 - го дня развития. На седьмой день личинок взвешивали и начинали обработку. Лекарства вводили путем кормления через желудочный зонд на 7 - й день после обработки. На 2 - й песчанок умерщвляли и подсчитывали оставшихся гельминтов. Процент эффективности рассчитывали путем сравнения количества гельминтов в обработанных животных с количеством гельминтов в необработанных животных, подвергнутых заражению, с использованием следующей формулы. В данных исследованиях каждую обработку повторяли три раза. В данных испытаниях лекарство растворяли в полиэтиленгликоле диметилсульфоксиде (1 : 2об/об) в количестве, достаточном для обработок, чтобы в организм каждого животного вводилось от 0,0313 до 0,1250мг/кг лекарства. Данные испытаний представлены в табл.1. Инсектицидное действие. Все указанные концентрации относятся к концентрациям активного ингредиента. Испытательные растворы приготавливали путем растворения активного ингредиента в 35% - ном растворе ацетона в воде (1000ч/млн), а затем разбавляли их водой по мере необходимости. Tetranychus urticae (P. стойкий штамм) клещ паутинный 2-пятнистый. Для исследования была отобрана фасоль лимская с листвой, развившейся до размера 7 8см. Растение обрезали, высаживая одно растение на горшок. Отрезали небольшой кусочек от листа, взятого из основной колонии, и накладывали на каждой лист испытуемых растений примерно за 2ч до обработки, с тем, чтобы клещи могли перемещаться к испытуемому растению и откладывать яйца. Размер отрезанного кусочка варьировали так, чтобы получалось примерно 100 клещей на лист. В момент обработки кусочек листа, используемый для переноса клещей, удаляли. Заряженные клещами растения погружали в испытательный раствор на 3с с перемешиванием и помещали под вытяжной колпак для сушки. Растения выдерживали в течение 2 дней, после чего определяли умерщвленных взрослых особей, используя первый лист. Второй лист находился на растении еще пять дней, после чего определяли количество погибших яиц и/или вновь появившихся бабочек. Empasca abrupta, взрослые особи, цикада картофельная. Листья фасоли лимской длиной 5см погружали в испытательный раствор на 3с с перемешиванием, а затем помещали под вытяжной колпак для сушки. Лист помещали в чашку Петри 100 ´ 10мм, содержащую на дне увлажненную фильтровальную бумагу. В каждую чашку вводили примерно 10 взрослых особей цикадок. Обработку осуществляли в течение 3 дней, после чего рассчитывали смертность насекомых. Heliothis virexens, листовертка-почкоед табачная, третьей возрастной стадии. Семядоли хлопчатника погружали в испытательный раствор и затем высушивали под вытяжным колпаком. После сушки каждую семядолю разрезали на четыре доли, каждый разрез помещали в пластмассовые медицинские чашки объемом 30мл, содержащие кусочек смоченного зубного тампона длиной 5 - 7мм. В каждую чашку помещали гусеницу третьей возрастной стадии и накрывали чашку картонной крышкой. Обработку осуществляли в течение трех дней, после чего рассчитывали смертность насекомых и определяли снижение степени повреждения (см. табл.2).

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

A process for preparation of macrolide compounds

Автори англійською

Derek R.Santerland, Osvi Z.Pereira, Hazel M.Poble, Michael V.G.Ramsey, John B.Vard, Richard A.Fletton, Edvard P.Tili

Назва патенту російською

Способ получения макролидных соединений

Автори російською

Дерек Р.Сантерленд, Осви З.Перейра, Хейзел М.Побл, Майкл В.Дж.Ремсей, Джон Б.Вард, Ричард А.Флеттон, Эдвард П.Тили

МПК / Мітки

МПК: C07D 493/22

Мітки: макролідних, одержання, спосіб, сполук

Код посилання

<a href="http://uapatents.com/5-18587-sposib-oderzhannya-makrolidnikh-spoluk.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб одержання макролідних сполук</a>

Подібні патенти