Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

(57) Способ получения пробиотика для животноводства, преимущественно птицеводства, путем раздельного культивирования, сепарирования и сушки штамма Enterococcus facclum ВКПМ № В-2575 и молочно-кислых бактерий с последующим смешиванием сухих монокультур, отличающийся тем, что из молочнокислых бактерий используют штаммы Lactobacillus salivarius ВКПМ № В-5001 и Lactobacillus fermentum ВКПМ № В-5006, а монокультуры смешивают при соотношении клеток 9-9,8:0,1-1,0:0.1-10,0 соответственно.

Текст

Дивитися

Способ получения пробиотика для животноводства, преимущественно птицеводства, путем раздельного культивирования, сепарирования и сушки штамма Enterococcus facclum ВКПМ № В-2575 и молочно-кислых бактерий с последующим смешиванием сухих монокультур, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что из молочнокислых бактерий используют штаммы Lactobacillus salivarius ВКПМ N? В-5001 и Lactobacillus fermentum ВКПМ № В-5006, а монокультуры смешивают при соотношении клеток 99,8:0,1-1,0:0.1-10,0 соответственно. Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается производства пробиотиков для птицеводства. Известны способы получения препара-' тов на основе молочнокислых бактерий (ацедофилин, ПАБК, СБА), которые рекомендуют использовать как в птицеводстве, так и в животноводстве. Они экологически чисты, нейтрализуют действие ксенобиотиков на микроорганизм и представляют альтернативу использованию антибиотиков в кормлении животных. Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому эффекту является способ получения пробиотика для сельскохозяйственных животных, предусматривающий раздельное культивирование, сепарирование и сушку штаммов Enterococcus faccium и Lactobacullus salivarius с последующим смешиванием сухих монокультур [1]. Препарат разработан для крупного рогатого скота, и для его получения используются штаммы, обладающие колонизационной способностью по отношению к эпителию желудочно-кишечного тракта телят. Однако пищеварительный тракт птиц имеет свои физиологические особенности, специфическую аутофлору, что не учтено в прототипе. В основу изобретения поставлена задача усовершенствования способа получения пробиотика для животноводства, преимущественно птицеводства, в котором за счет введения новых селекционированных культур молочнокислых бактерий обеспечивается направленное формирование и Стабилизация микробного.ценоза пищева С > О 21951 рительного тракта птиц и за счет этого обеспечивается увеличение их продуктивности и снижение отрицательного воздействия стрессов. Поставленная задача решается тем, что в способ получения пробиотика, включающий раздельное культивирование, сепарирование и сушку штамма Enterococcgs faccium ВКПМ № 2579 и молочно-кислых бактерий с последующим смешиванием сухих монокультур, согласно изобретению вводятся селекционированные культуры индигенной микрофлоры пищеварительного тракта птиц Lactobacullus salivarius ВКПМ № 5001 и Lactobacillus fermentum ВКПМ N? 5005, а монокультуры смешиваются при соотношении клеток 9-9,8:01:0,1-1,0 соответственно. Нормальная микрофлора цыплят формируется в течение первого месяца после вылупления [1]. Состав молочнокислых бактерий в этот период изменяется от энтерококков до преобладания определенных видов лактобацилл [2]. Антагонистическая активность обнаружена у 70% штаммов Lsulivarlus, 40% - Lfermentum, 25% Lbuchneri и практически у всех энтерококков. Установлено, что отдельные штаммы, обладающие значительной антагонистической активностью, способны адгезировать на эпителиальных клетках тонкого кишечника, кур (3), коленизируя его, синтезировать витамины группы В и другие биологически активные вещества,^устойчивы к действию ряда антибиотиков. Штаммы, составляющие основу препарата, селекционированы по вышеупомянутым признакам и депонированы во Всесоюзной коллекции промышленных м и к р о о р г а н и з м о в института "ВНИИгенетика". Представители селекционированных видов лактобацилл и энтерококков наиболее часто встречаются в составе нормальной микрофлоры пищеварительного тракта птиц (2). Штамм E.facclum ВКПМ В-2579 - факультативный анаэроб, каталозоотрицательный, образует аммиак из аргинина, гидролизует экскулин, растет в среде с рН 9,6 с 6,5% NaCI, 40% желчи, 4% таурохолата натрия, выживает после прогрева при 63°С в течение 30 минут, восстанавливает молоко с лакмусом и метиленовой синью, сбраживает маннозу, галактозу, трегалозу, мальтозу, сахарозу, раффинозу, глюкозу, лактозу, салицин, целлобиозу, фруктозу. Растет при температуре +10 и 50°С. Штамм синтезирует витамины группы В: тиамин 1,0-1,6 мкг/г СВ, рибофлавин 2022,5, никотиновую кислоту 450-675, пиридоксин 2-3,7; угнетает рост патогенных 5 10 15 20 25 30 35 40 . 4 кишечных палочек, сальмонелл, протея, стафилококка, шигелл; синтезирует ряд аминокислот, в том числе н е з а м е н и м ы е фенилаланин - 24 мкг/мл, лейцин - 29, лизин - 5, треонин - 1 1 ; обладает высоким индексом адгезивности к энтероцитам кищечника цыплят(4,68±2,67). Устойчив и малочувствителен (диаметр зон угнетения роста до 10 мм) к действию тетрациклина, олеандомицина, метициллина, оксациллина, аминогл икозидных антибиотиков (стрептомицина, канамицина). Штамм обладает антистрессовым и противоопухолевым действием. Оптимальная температура для роста 3744°С, рН среды 6,5-6,7, концентрация углеводов ( г л ю к о з ы , сахарозы) 1,7-2,2%, аминного азота ферментолизата БВК 20-60 мг%. Достигает высокой удельной скорости роста (1,4 ч 1 ). Штамм Lsalivarius ВКПМ В-5001 - факультативный анаэроб, каталазоотрицательный, сворачивает и слабо пептонизирует молоко, растет при 40% желчи, гомоферментативный, растет при 45°С, но не при 20 и 50°С, сбраживает фруктозу, галактозу, лактозу, мальтозу, маннит, маннозу, риффинозу, сахарозу, трегалозу, глюкозу, мелибиозу. Синтезирует витамины группы В: 950 мкг/гСВ никотиновой кислоты, 95 рибофлавина, 3,1 пиридоксина, 10 тиамина; аминокислоты: аланин - 17 мкг/мл, цистеин - 32, лейцин - 12, лизин 4; угнетает рост патогенных кишечных палочек, протея, сальмонелл, стафилококков. Адгезирует к энтероцитам кишечника цыплят, обладая колонизационной резистентностью (ИAM 1,3±0,51). Устойчив и малочувствителен к тетрациклину, олеандомицину, метициллину, оксациллину, аминогликозидам (стрептомицину, канамицину). Оптимальные условия для роста: температура 42-48°С, рН среды 5,8-6,0, концент45 рация углеводов (глюкозы, сахарозы) 2,2-2,5 %, аминного азота ферментолизата БВК 6488 мг%. Скорость роста при оптимальных условиях достигает 1,0 ч*1. Штамм Lfermentum ВКПМ В-5005- фа50 культативный анаэроб, каталазоотрицательный, гетероферментативный, сворачивает и слабопептонизирует молоко, растет в среде с 4% таурохолата а, растет при 45°С, но не при 15°С Сбраживает фрук55 тозу, галактозу, глюкозу, лактозу, мальтозу, раффинозу, сахарозу, мелибиозу, рибозу. Синтезирует витамины группы В: 125 мкг/гСВ никотиновой кислоты, 35 рибофлавина, 1,0 пиридоксина, 10,5 тиамина; угне 21951 ки концентрируют в 10-12 раз с помощью тает рост патогенных кишечных палочек, сепарирования и высушивают на распылисальмонелл, протея, клебсиолл. тельной сушилке при температуре воздуха Обладает способностью адгезировать к на входе - 95° и на выходе - 65°С для энтеэнтероцитэм кишечника цыплятам (ИАМ рококков и 65° на входе и 40° на выходе 1,42 ±0,58). Устойчив и малочувствителен к для лактобацилл. Влажность порошка не бодействию тетрациклина, левомицитина, лее 10%, активность 150-2000 млрд кл/г для олеандомицина, пенициллина, оксациллиэнтерококков и 1-10 млрд кл/г для лактобана, метициллина. цилл. Оптимальные условия для роста: темпеПрепараты сухих монокультур ратура 42-48°С, рН среды 5,8-6,0, концент- 10 E.faccium, Lsalivarius, Lfermentum смеширация углеводов (глюкозы, сахарозы) вают, чтобы получить соотношение клеток 2,2-2,5%, аминного азота ферментолизата 9-9,8:0,1-1,0:0,1-1,0, и стандартизуют кукуБВК - 64-88 мг%. Скорость роста при оптирузной мукой или цеолитом до активности мальных условиях достигает 0,7 ч" . 15 50 и/или 10 млрд кл/г. Культивирование, сепарирование и сушку штаммов осуществляют раздельно. П р и м е р 2. Пробиотик получают как Раздельное культивирование штаммов поописано выше, но с использованием при зволяет провести этот процесс при оптиприготовлении питательной среды свекломальных для каждой культуры параметрах, что обеспечивает получение высокого титра 20 вичной мелассы вместо ферментолизата клеток в культуральной жидкости и увеличекрахмала (учитывая содержание сахара в ние выхода готового препарата. мелассе). П р и м е р 3. Пробиотик получают как П р и м е р 1.С целю получения препаописано выше, но в питательную Среду дората готовят питательную среду, содержащую ферментативные гидролизаты 25 полнительно вносят 0,3% кукурузного экстракта в качестве источника ростовых крахмала и БВК в концентрациях, оптимальвеществ. ных для роста культур. Вносят 0,1% посевного материала и выращивают при Применение пробиотика в птицеводстоптимальных условиях с постоянно работаве обеспечивает формирование и стабилиющей мешалкой, без подачи воздуха; нуж- 30 зацию нормального микробного ценоза ное рН поддерживают 20%-ным водным пищеварительного тракта молодняка цыпаммиаком. Длительность ферментации в залят, повышение суточных лривесов и совисимости от культуры 9-18 ч, титр клеток в хранности, снижение затрат корма и культуральной жидкости 1-9 млрд/мл. Клетотрицательного действия стрессов. 35 Количество молочнокислых бактерий в содержимом зоба 15-дневных цыплят Группа Количество млн/г Контрольная Опытная Упорядник Замовлення 4462 в % к нормальному уровню 10±6,36 37±3,56 5,9±3,72 21,8±2,1 Техред М.Келемеш Коректор М. Керецман Тираж Підписне Державне патентне відомство України, 254655, ГСП, Київ-53, Львівська пл., 8 Відкрите акціонерне товариство "Патент", м. Ужгород, вул.ГагарІна, 101 І

Додаткова інформація

Автори англійською

Podhorskyi Valentyn Stepanovych, Holovach Tetiana Mykolaivna, Kasumova Svitlana Oleksiivna, Matsiuk Volodymyr Maksymovych, Havrylenko Mykhailo Mykolaiovych, Palekha Svitlana Ivanivna

Автори російською

Подгорский Валентин Степанович, Головач Татьяна Николаевна, Касумова Светлана Алексеевна, Мацюк Владимир Максимович, Гавриленко Михаил Николаевич, Палеха Светлана Ивановна

МПК / Мітки

МПК: A61K 35/66

Мітки: одержання, переважно, тваринництва, птахівництва, пробіотика, спосіб

Код посилання

<a href="http://uapatents.com/4-21951-sposib-oderzhannya-probiotika-dlya-tvarinnictva-perevazhno-ptakhivnictva.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб одержання пробіотика для тваринництва, переважно птахівництва</a>

Подібні патенти