Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

Способ определения повреждений отделов нефрона путем гистоэнзимохимического исследования биопсийного материала включающий оценку активности щелочной фосфатазы по числу гранул маркера, с последующим определением повреждения в сравнении с контролем, отличающийся тем, что дополнительно проводят оценку активности сукцинатдегидрогеназы по числу гранул формазана и при снижении количества гранул формазана относительно контроля определяют повреждения в дистальном участке нефрона, а при наличии гранул маркера щелочной фосфатазы и снижении числа гранул формазана - повреждение проксимального отдела нефрона.

Текст

Изобретение относится к медицине, а именно к нефрологии, и может быть использовано для определения повреждения отделов нефрона. Целью изобретения является повышение информативности способа за счет возможности дифференциального определения повреждения в дистальном и проксимальном отделах нефрона. Способ осуществляют следующим образом. Криостатный срез биопсийного материала почки инкубируют в среде для выявления активности сукцинатдегидрогеназы (инкубационную среду готовят непосредственно перед опытом, смешивая равные объемы 0,2 Μ фосфатного буфера с рН-7,6 и 0,2 Μ раствора сукцината натрия к 10 мл данного раствора добавляют 10 мл раствора 10 мг нитросинего тетразолия (НСТ) в воде). В местах высокой активности сукцинатдегидрогеназы выпадают фиолетовые гранулы гидразинтетразолия. Затем эти срезы после промывки в дистиллированной воде инкубируют в среде для выявления активности щелочной фосфатазы (инкубационную среду готовят также непосредственно перед опытом, для чего растворяют 5 мг нефтол - AsBi - фосфата в 0,25 мл диметилформамида, добавляют 25 мл дистиллированной воды и 25 мл 0,2 Μ трис-НСІ буфера с рН 8,7. Сюда же прибавляют 30 мг прочного красного TR). В местах высокой активности щелочной фосфа тазы выпадают красные гранулы красителя. Таким образом, вокруг гранул щелочной фосфатазы как маркера проксимального отдела нефрона выявляется сукцинатдегидрогеназа, по снижению активности которой определяют повреждение проксимального канальца, а при изолированно выявляемом снижении активности сукцинатдегидрогеназы определяют повреждение дистального отдела нефрона. Пример 1. Больной П., поступил с жалобами на боли в области поясницы, общую слабость; В анамнезе: перенес острый гломерулонефрит. Объективно: артериальное давление 140/90мм рт.ст., анемия (эритроциты 3,8 - 1012/л, гемоглобин 130 г/л), протеинурия 1,12 r/сут, эриттюцитурия 6,5×106/сут, цилиндрурия 7,3 × 104/сут. Симптом Пастернацкого положительный. При гистологическом исследовании биопсийного материала подтвержден диагноз хронического гломерулонефрита (мембранозный тип). При исследовании биопсийного материала почки на СДГ идентифицированы проксимальные и дистальные отделы нефрона 60 из 100 наблюдаемых фрагментов почечных канальцев, а при использовании предлагаемого способа 100 из 100. В результате достигается поставленная цель. Пример 2. Больная С, поступила с жалобами на общую слабость, головную боль. В анамнезе: перенесла острый гломерулонефрит. Объективно: артериальное давление 140/80мм рт.ст., анемия (эритроциты 3,9 × 1012/л, гемоглобин 126 г/л), протеинурия 1,33 r/сут, эритроцитурия 7,2х106/сут, цилиндрурия 8,2 · 104/сут. Симптом Пастернацкого отрицательный. При гистологическом исследовании биопсийного материала почки подтвержден диагноз хронического гломерулонефрита (мембранозный тип). При исследовании биопсийного материала почки на СДГ идентифицированы проксимальные и дистальные отделы нефрона 60 из 100 наблюдаемых фрагментов почечных канальцев, а при использовании заявленного способа 100 из 100. В результате достигается поставленная цель. Пример 3. Больная Ю. поступила с жалобами на общую слабость, головную боль, боль в области поясницы. В анамнезе: острый гломерулонефрит. Объективно: артериальное давление 150/90мм рт.ст., анемия (эритроциты 3,6×1012/л, гемоглобин 130 г/л), протеинурия 0,98 г/сут, эритроцитурия 7,1×106/сут, цилиндрурия 4,8×104/сут. Симптом Пастернацкого положительный. При гистологическом исследовании биопсийного материала почки подтвержден диагноз хронического гломерулонефрита (мембранозный тип). При исследовании биопсийного материала почти на СДГ идентифицированы проксимальные и дистальные отделы нефрона 60 из 100 наблюдаемых фрагментов почечных канальцев, а при использовании заявленного способа 100 из 100. В результате достигается поставленная цель. Всего было обследовано предложенным способом 90 лабораторных животных (крыс) с сулемовой и цисплатиновой нефропатией и 6 больных с гломерулонефритом, у которых с точностью 100% были определены повреждения отделов нефрона.

Дивитися

Додаткова інформація

Назва патенту англійською

Method for determination of damage of nephron parts

Автори англійською

Rohovyi Yurii Yevhenovych, Hozhenko Anatolii Ivanovych, Mahalias Viktor Mykolaiovych

Назва патенту російською

Способ определения повреждений отделов нефрона

Автори російською

Роговой Юрий Евгеньевич, Гоженко Анатолий Иванович, Магаляс Виктор Николаевич

МПК / Мітки

МПК: C12N 9/12, G01N 33/48, C12Q 1/42, C12N 9/04, C12Q 1/32

Мітки: спосіб, відділів, визначення, нефрону, пошкоджень

Код посилання

<a href="http://uapatents.com/1-19211-sposib-viznachennya-poshkodzhen-viddiliv-nefronu.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб визначення пошкоджень відділів нефрону</a>

Подібні патенти